? 靈敏 — 準(zhǔn)確檢測低至 5 µg/mL（熒光法）或 25 µg/mL（比色法）的肽混合物
? 可重現(xiàn) — 檢測試劑盒的性能已使用肽消化混合物進(jìn)行嚴(yán)格檢測
? 可靠的肽消化標(biāo)準(zhǔn)品 — 試劑盒包括一種經(jīng)驗(yàn)證的肽消化標(biāo)準(zhǔn)品，可提高定量的可重現(xiàn)性
? 兼容 — 可與多種試劑配合使用，包括 MS 樣品制備試劑和 TMT 標(biāo)記肽（熒光測定）
? 方便 — 簡單的混合讀取形式，在短短5分鐘（熒光法）或15分鐘（比色法）內(nèi)便可讀到穩(wěn)定信號(hào)

Pierce 定量比色肽檢測試劑盒提供了改良的 BCA 試劑（用于將 Cu+2 還原為 Cu+1）、經(jīng)優(yōu)化的專有螯合劑（用于定量肽混合物）以及肽消化參考標(biāo)準(zhǔn)品（用于生成對(duì)照線性標(biāo)準(zhǔn)曲線）。這款比色肽檢測試劑盒只需少量樣品 (20 µL)，且工作肽濃度范圍為 25–1000 μg/mL。在反應(yīng)中，先在堿性條件下通過肽的酰胺主鏈還原銅（雙縮脲反應(yīng)），隨后，還原的銅與螯合物結(jié)合形成明亮的紅色復(fù)合物（吸收波長為 480 nm），在短短15分鐘內(nèi)便可讀取到該復(fù)合物。該反應(yīng)產(chǎn)生的信號(hào)比用于肽分析的 Micro-BCA 蛋白檢測試劑盒靈敏 3–4 倍。比色肽檢測試劑盒與 TMT 標(biāo)記肽兼容，但不建議用于合成肽，因?yàn)樵摍z測試劑盒會(huì)受到肽氨基酸含量的影響。

Pierce 定量熒光肽檢測試劑盒的試劑包括肽測定緩沖液、熒光肽標(biāo)記試劑以及用于肽濃度定量測定的肽消化測定標(biāo)準(zhǔn)品。這款靈敏的檢測試劑盒僅需 10 µL 樣品，會(huì)隨著肽濃度增加 (5–1000 μg/mL) 而產(chǎn)生線性響應(yīng)，并且可生成在短短5分鐘內(nèi)便能檢測到的穩(wěn)定最終熒光。在此檢測試劑盒中，使用胺反應(yīng)性熒光試劑（直到與肽反應(yīng)才會(huì)發(fā)出熒光）在肽的氨基末端添加了特異性標(biāo)記。在微孔板讀數(shù)儀 (ex390/em475) 上檢測熒光標(biāo)記的肽。該檢測試劑盒適用于定量測定肽消化混合物和氨基末端未封閉的合成肽。熒光檢測試劑盒與 TMT 標(biāo)記肽不兼容。

Thermo Scientific 肽消化測定標(biāo)準(zhǔn)品旨在用作與 Pierce 定量熒光和比色肽檢測試劑配合使用的參考標(biāo)準(zhǔn)品，以提高肽定量的可重現(xiàn)性和準(zhǔn)確性。肽消化測定標(biāo)準(zhǔn)品以濃度為 1 mg/mL 的即用型液體規(guī)格提供。已使用 MS 級(jí)消化參考蛋白，以盡量減少缺失的切割。為確保性能一致，監(jiān)測蛋白的酶切效率以確保批間一致性，并通過與參比標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行比較來評(píng)估質(zhì)量。

應(yīng)用
? 對(duì)樣品濃度進(jìn)行歸一化，以便用于下游定量應(yīng)用
? 對(duì)上樣量進(jìn)行歸一化，以便用于 LC、MS 和 LC/MS 應(yīng)用
? 在肽純化步驟后測量回收率