醫(yī)用級(jí)膽固醇輔料藥GMP認(rèn)證

本品為膽甾-5 烯-3β-醇。按干燥品計(jì)算，含膽固醇（C₂₇H₄₆O）應(yīng)為95.0%～102.0%；若為供注射用，按干燥品計(jì)算，含膽固醇（C₂₇H₄₆O）應(yīng)為97.0%～102.0%。

【性狀】

本品為白色或類白色結(jié)晶性粉末或塊狀結(jié)晶。

熔點(diǎn)　本品的熔點(diǎn)為147～150℃。

比旋度　取本品，精密稱定，加二氧六環(huán)溶解并定量稀釋制成每1ml中含20mg的溶液，比旋度應(yīng)為-34°至-38°。

過氧化值（供注射用）　本品的過氧化值不得過10。

【鑒別】（1）本品的紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照品的圖譜一致。

（2）在含量測(cè)定項(xiàng)下記錄的色譜圖中，供試品溶液主峰的保留時(shí)間應(yīng)與對(duì)照品溶液主峰的保留時(shí)間一致。

乙醇中不溶物　取本品0.5g，加乙醇50ml，溫?zé)崾谷芙夂螅o置2小時(shí)，不得產(chǎn)生沉淀或渾濁。

精密量取供試品溶液適量，用衍生化溶液定量稀釋制成每1ml中約含125μg的溶液，作為對(duì)照溶液。

照氣相色譜法測(cè)定，以50%苯基-50%甲基聚硅氧烷（或極性相近）為固定液的毛細(xì)管柱為色譜柱；起始溫度為250℃，以每分鐘6℃的速率升溫至280℃，維持30分鐘；進(jìn)樣口溫度為280℃；檢測(cè)器溫度為280℃。

精密量取供試品溶液和對(duì)照溶液各1μl，分別注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，對(duì)照溶液色譜圖中主峰理論板數(shù)應(yīng)不小于5000。

供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰，單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液主峰面積（0.5%），各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對(duì)照溶液主峰面積的2倍（1.0%）。

其他甾醇（供注射用）　照含量測(cè)定項(xiàng)下的方法測(cè)定，供試品溶液的色譜圖中除溶劑峰與內(nèi)標(biāo)溶液引入峰外，如有其他雜質(zhì)峰，相對(duì)保留時(shí)間小于或等于膽固醇保留時(shí)間1.5倍的其他甾醇總量不得過主峰峰面積的2.0%（非豬腦來源）或3.0%（豬腦來源）。供試品溶液色譜圖中小于或等于0.05%的峰忽略不計(jì)。

苯甲酰脲（羊毛脂來源且供注射用）　取本品1.0g，精密稱定，置碘量瓶中，加正庚烷200ml，磁力攪拌使溶解，全部轉(zhuǎn)移至帶有聚四氟乙烯活塞的分液漏斗中，加乙腈10ml振搖，靜置使分層，收集下層乙腈提取液，在分液漏斗中再加乙腈10ml振搖，靜置使分層，收集并合并2次乙腈提取液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干后，精密加入乙腈-水（1∶1）1.0ml溶解殘?jiān)?，超?分鐘使溶解，以每分鐘4000轉(zhuǎn)的速率離心5分鐘，取上清液過濾，作為供試品溶液。

另取二氟脲與殺鈴脲各適量，精密稱定，加乙腈溶解并定量稀釋制成每1ml中各約含0.1μg的溶液，作為對(duì)照貯備液；精密量取5ml，置10ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液（1）。

另取本品1.0g，精密稱定，置碘量瓶中，加正庚烷200ml，磁力攪拌使溶解，全部轉(zhuǎn)移至帶有聚四氟乙烯活塞的分液漏斗中，加對(duì)照貯備液0.5ml與乙腈9.5ml振搖，靜置使分層，收集下層乙腈提取液，在分液漏斗中再加乙腈10ml振搖，靜置使分層，收集并合并2次乙腈提取液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干后，精密加入乙腈-水（1∶1）1.0ml溶解殘?jiān)?，超?分鐘使溶解，以每分鐘4000轉(zhuǎn)的速率離心5分鐘，取上清液過濾，作為對(duì)照溶液（2）。

取對(duì)照溶液（1）3ml，用乙腈-水（1∶1）稀釋至10ml，搖勻，作為靈敏度溶液。

照高效液相色譜法測(cè)定，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水（1∶1）為流動(dòng)相A，以乙腈為流動(dòng)相B，按下表進(jìn)行梯度洗脫；檢測(cè)波長為254nm。

取靈敏度溶液100μl注入液相色譜儀，殺鈴脲峰峰高的信噪比應(yīng)大于5。

精密量取供試品溶液、對(duì)照溶液（1）與對(duì)照溶液（2）各100μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。供試品溶液的色譜圖中如有與對(duì)照溶液（1）中二氟脲峰和殺鈴脲峰保留時(shí)間一致的色譜峰，其峰面積均不得大于對(duì)照溶液（2）中的相應(yīng)峰面積的0.5倍（0.000 005%）。

干燥失重　取本品，在105℃干燥至恒重，減失重量不得過0.3%；若為供注射用，減失重量不得過0.1%。

熾灼殘?jiān)?/strong>　取本品1g，遺留殘?jiān)坏眠^0.1%。

細(xì)菌內(nèi)毒素（供注射用）　取本品，加無水乙醇溶解至20mg/ml（必要時(shí)加熱到60℃加快溶解），用0.5mg/ml聚氧乙烯（35）蓖麻油水溶液稀釋成10mg/ml，再用1.0 mg/ml聚氧乙烯（35）蓖麻油水溶液稀釋，選擇靈敏度為0.06EU/ml的鱟試劑，每1mg膽固醇（供注射用）中含內(nèi)毒素的量應(yīng)小于標(biāo)示值。

微生物限度（供注射用）　取本品，每1g供試品中需氧菌總數(shù)不得過10²cfu。

【含量測(cè)定】照氣相色譜法測(cè)定。

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)　以5%苯基-95%甲基聚硅氧烷（或極性相近）為固定液的毛細(xì)管柱，柱溫為275℃；進(jìn)樣口溫度為285℃；檢測(cè)器溫度為300℃；載氣為氮?dú)?，載氣流速為每分鐘1.2ml。膽固醇峰與內(nèi)標(biāo)峰的分離度應(yīng)不小于10.0。

內(nèi)標(biāo)溶液的制備　取孕烯醇酮異丁酸酯適量，加正庚烷溶解并定量稀釋制成每1ml中約含1mg的溶液，即得。

測(cè)定法　避光操作。取本品約25mg，精密稱定，置25ml量瓶中，加內(nèi)標(biāo)溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液，精密量取1μl注入氣相色譜儀，記錄色譜圖。

另取膽固醇對(duì)照品，同法測(cè)定。按內(nèi)標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。

【類別】乳化劑。

【貯藏】遮光，密封保存。

【標(biāo)示】①應(yīng)標(biāo)明本品的來源，動(dòng)物或植物來源；若為動(dòng)物來源，還應(yīng)標(biāo)明使用的物種和組織，如豬腦、雞蛋黃、羊毛脂、牛脊髓等。②若為牛源性的膽固醇，應(yīng)提供TSE/BSE潛在風(fēng)險(xiǎn)聲明。

注：①應(yīng)標(biāo)明每1mg膽固醇（供注射用）中含內(nèi)毒素的標(biāo)示值。②為滿足制劑安全性和有效性要求，必要時(shí)，可對(duì)本品中的元素雜質(zhì)鎳進(jìn)行控制。