毛細管電泳流動注射化學發(fā)光檢測辣根過氧化物酶及其在免疫分析中的應用
辣根過氧化物酶(HorseradishPeroxidase,HRP)是從植物辣根中提取出來的一種由無色的酶蛋白和深棕色的葉琳結合而成的糖蛋白,能催化魯米諾(luminol)、異魯米諾(isoluminol)及其衍生物而發(fā)光.由于其具有穩(wěn)定性好、比活性高和特異性強等優(yōu)點而被作為標記物廣泛用于酶免疫分析中.本實驗結合毛細管電泳及其流動注射分析技術,發(fā)展了一種更加簡便快速的檢測HRP的方法,并很好地應用于免疫分析中.在以往的免疫分析中多用放射免疫分析法或者是酶免疫分析法,但放射免疫分析會產生對人體有極毛細管電泳一化學發(fā)光檢測系統(tǒng)定量分析研究
化學發(fā)光是一種高靈敏的檢測方法,已成功地用于毛細管電泳在線檢測.但目前我們尚未發(fā)現毛細管電泳一化學發(fā)光檢測方法用于定量分析的報道.定量分析的準確度和精密度是該方法能否用于實際分析的關鍵.本文將自制的高靈敏化學發(fā)光檢測器與商品化毛細管電泳儀聯用,探索毛細管電泳一化學發(fā)光檢測方法用于定量分析的可能性。毛細管電泳-激光誘導熒光鞘流檢測系統(tǒng)優(yōu)化研究及在基因分析中的應用
毛細管電泳-激光誘導熒光鞘流檢測裝置進行了系統(tǒng)的優(yōu)化。探討了鞘流速度、激光功率和檢測的位置對檢測信號的影響以及鞘流速度與峰面積和理論塔板數的關系。在優(yōu)化的條件下,對熒光素檢測的線性范圍為1×10-8~1×10-10mol/L;檢出限為7.5×10-11mol/L(S/N=3)。使用聚N,N-二甲基丙烯酰胺(PDMA)為雙功能非膠篩分介質,將毛細管電泳-激光誘導熒光鞘流檢測系統(tǒng)成功地用于DNA片段及基因PCR擴增產物分離檢測。精密儀器室等必須之精密控制溫濕度的設備-標準實驗室溫濕度控制主機
控制範圍:a溫度:20℃~35℃。b濕度:45%~75%RH。3、解析精度:a溫度:0.1℃。b濕度:0.1%RH??刂凭?a溫度:±1.0℃。b濕度:±3.0%RH。冷凍系統(tǒng)及加熱系統(tǒng):a法國原裝進口鐵甲武士省電型率壓縮機。b採風冷式冷卻系統(tǒng)。c斜率式FIN-TUBE蒸發(fā)器。d原裝進口乾燥過濾器,膨脹閥等冷凍元件。e內螺旋式K-TYPE冷媒銅管。f加溫、降溫系統(tǒng)*獨立。g鰭片式高速電熱器。加濕及除濕系統(tǒng):a採用電子併位方式微動加濕系統(tǒng)。(SSR驅動)b加濕筒採整座不鏽鋼製成。c採蒸發(fā)器盤管露