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問答分享:ELISA試劑盒是否能夠重復(fù)使用
本生BUNSEN結(jié)合ELISA試劑盒質(zhì)量影響因素、實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范的相關(guān)的使用,ELISA試劑盒?不建議完整重復(fù)使用?,僅部分組件在嚴(yán)格限定條件下可有限復(fù)用,核心檢測(cè)組件必須一次性使用。
一、判定結(jié)論
ELISA試劑盒設(shè)計(jì)為一次性使用,板孔上的抗體經(jīng)過一次反應(yīng)后已結(jié)合,無法再次用于新的檢測(cè),強(qiáng)行重復(fù)使用會(huì)直接導(dǎo)致結(jié)果失效。
二、可有限復(fù)用的組件
可拆卸酶標(biāo)板未使用孔位?:96T規(guī)格的試劑盒,未使用的空白包被孔在2-8℃密封保存、有效期內(nèi),可分次拆分使用,一般可分2-3次用完。
洗滌緩沖液?:過濾后最多可重復(fù)使用2次,使用前需確認(rèn)pH值和吐溫20濃度未發(fā)生明顯變化。
三、絕對(duì)不可復(fù)用的組件
標(biāo)準(zhǔn)品溶液、底物溶液、生物素標(biāo)記抗體、酶標(biāo)二抗等核心試劑,凍融或接觸樣本后活性會(huì)快速衰減,復(fù)用會(huì)直接導(dǎo)致假陰性、假陽(yáng)性結(jié)果,必須一次性使用。
四、復(fù)用的嚴(yán)格限制條件
僅科研預(yù)實(shí)驗(yàn)可嘗試有限復(fù)用,臨床檢測(cè)、關(guān)鍵正式實(shí)驗(yàn)嚴(yán)禁復(fù)用;復(fù)用前需驗(yàn)證孔間變異系數(shù)CV<15%、標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)R2≥0.98,確保結(jié)果可靠性。
五、重復(fù)使用的潛在風(fēng)險(xiǎn)
微生物與交叉污染:多次開蓋操作易引入雜菌、氣溶膠殘留,拉高非特異性背景值,假陽(yáng)性率大幅上升。
核心試劑失活:酶標(biāo)記抗體反復(fù)暴露在室溫中,酶活性會(huì)逐步氧化失活,導(dǎo)致顯色信號(hào)系統(tǒng)性偏低。
結(jié)果失真:多次使用后標(biāo)準(zhǔn)品降解、包被層受潮變性,標(biāo)準(zhǔn)曲線線性失效,所有樣本的定量結(jié)果失去參考價(jià)值。
注:以上資料僅供參考,不作為實(shí)際數(shù)據(jù),實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。
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