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PCR反應模板核酸的提取制備方法2022/10/17
PCR反應的關(guān)鍵因素主要有引物的選擇與設計，酶的質(zhì)量。模板的制備，在前二者都穩(wěn)定可行的情況下，PCR模板的制備尤為重要。模板處理方法的選擇及操作人員的基本技能，決定分離模板核酸(DNA或RNA)的質(zhì)和...
標準物質(zhì)特性和基本要求具體分析2022/10/10
標準物質(zhì)定義：為了保證分析測試結(jié)果具有一定的準確度，并具有可比性和一致性，常常需要一種用來校準儀器、標定溶液濃度和評價分析方法的物質(zhì)。標準物質(zhì)已經(jīng)確定了具有一個或多個足夠均勻的特性值的物質(zhì)或材料，作為...
了解單克隆抗體必看干貨2022/10/5
單克隆抗體(monoclonalantibody，Mab)技術(shù)是20世紀免疫學技術(shù)的一項里程碑式突破．該技術(shù)將免疫小鼠的B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合生成雜交瘤細胞，這種雜交瘤細胞核內(nèi)含有雙親細胞的染...
ELISA試驗手工洗滌操作過程2022/9/26
洗滌在ELISA試驗過程中雖不是一個反應步驟，但卻也決定著實驗的成敗。ELSIA試驗就是靠洗滌來達到分離游離的和結(jié)合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反...
抗體特異性選擇需考慮的四個方面2022/9/19
抗體(antibody)免疫細胞分泌免疫物質(zhì)，是哺乳動物適應性免疫系統(tǒng)對抗病原體的核心，它是在病原體刺激下由漿細胞（效應B細胞）所分泌的一種免疫球蛋白，能夠識別并結(jié)合特異的病原體抗原，隨后通過介導中和...
樣品的采集檢測及培養(yǎng)基的滅菌使用2022/9/13
樣品的采集及檢測:一、保證采樣器具的無菌性1.玻璃器皿：采用干熱滅菌方式進行滅菌，保證恒溫、時間足夠（但不可時間過長，導致玻璃器皿易裂紋而報廢）。2.取樣筐：使用前要用75%酒精進行噴灑消毒3.取樣勺...
細胞凋亡概述2022/9/5
細胞凋亡（apoptosis）是指細胞在一定的生理或病理條件下，受內(nèi)在遺傳機制控制，按照自身程序主動性、生理性的死亡過程。細胞凋亡受凋亡相關(guān)基因調(diào)控，故又稱為程序性細胞死亡（programmedcel...
按抗原來源與宿主的親緣關(guān)系分類及其制備的方法2022/8/30
根據(jù)抗原的來源以及與宿主的親緣關(guān)系分類指來自機體以外的物質(zhì)。其制備的方法又分為：1、天然抗原是指自然界存在的蛋白質(zhì)、多糖和結(jié)合蛋白。這類抗原相對分子量大、結(jié)構(gòu)復雜，研究其免疫原性和反應原性的特異性有較...
ELISA出現(xiàn)“花板”原因及解決辦法2022/8/22
酶聯(lián)免疫吸附試驗(EnzymeLinkedImmunoSorbentAssay，ELISA)于1971年分別由瑞典學者和荷蘭學者報道，開創(chuàng)了運用酶標記免疫技術(shù)進行液體標本中微量物質(zhì)測定的實驗方法。其原...
PCR引物設計的幾個原則2022/8/15
PCR引物設計的目的是找到一對合適的核苷酸片段，使其能有效地擴增模板DNA序列。如前述，引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否。對引物的設計不可能有一種包羅萬象的規(guī)則確保PCR的成功，但遵循某些...
逆轉(zhuǎn)錄實驗要素解說2022/8/8
逆轉(zhuǎn)錄（reversetranscription）是以RNA為模板合成DNA的過程，即RNA指導下的DNA合成，逆轉(zhuǎn)錄實驗包括3大要素，分別是引物、逆轉(zhuǎn)錄酶和RNA模板：1.引物：逆轉(zhuǎn)錄引物主要有3種...
PCR反應特點與流程2022/8/1
PCR（Polymerasechainreaction，聚合酶鏈式反應）是模擬體內(nèi)DNA復制過程，對特定DNA序列進行大量擴增的一種技術(shù)。PCR反應是以4種dNTP為底物，引物引導，DNA聚合酶催化作...
選購ELISA試劑盒步驟及重點考慮要素2022/7/25
ELISA試劑盒的選擇有許多考慮的因素,比如說實驗目的、價格、操作方法等因素。比如檢測蛋白,基本有下列步驟：第一步，明白檢測何種蛋白。第二步，明確編碼該蛋白的基因與其他哪些物種同源性最好。第三步，尋找...
免疫學ELISA、免疫組化、WB三大工具特性2022/7/18
ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）：用到了免疫學原理和化學反應顯色，待測的樣品多是血清、血漿、尿液、細胞或組織培養(yǎng)上清液，因而沒有用到組織包埋、切片等技術(shù)，這是與免疫組化的主要區(qū)別，操作上開始需要將抗原或...
免疫熒光技術(shù)實驗具體流程2022/7/12
免疫熒光技術(shù)(Immunofluorescencetechnique)又稱熒光抗體技術(shù)，是標記免疫技術(shù)中發(fā)展*早的一種。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術(shù)的基礎上建立起來的一項技術(shù)。很早以來就有一些學...
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