魚(yú)皮膠原蛋白生產(chǎn)線產(chǎn)品簡(jiǎn)介

膠原蛋白的提取一般有三種方法：一是高壓輔助的物理方法；二是用溶劑預(yù)處理結(jié)合低溫或熱水抽提的化學(xué)方法，根據(jù)溶劑 的不同，可分為熱水浸提法、酸法、堿法、鹽法；三是用酶的生物化學(xué)法。一般來(lái)說(shuō)，高壓輔助和熱水抽提針對(duì)明膠的提取，而低溫抽提和酶法針對(duì)膠原的提取，但 其基本原理都是根據(jù)膠原蛋白的特性改變蛋白質(zhì)所在的外界環(huán)境，把膠原蛋白從其他蛋白質(zhì)中分離出來(lái)。在實(shí)際提取過(guò)程中，不同提取方法之間往往相互結(jié)合，可以得到較好的提取效果。采用超高壓處理系統(tǒng)對(duì)原料給予高壓處理一段時(shí)間，使其組織結(jié)構(gòu)和膠原蛋白的三股螺旋結(jié)構(gòu)發(fā)生松弛、變性，便于分離提取。 水法熱水提取法是將原料經(jīng)過(guò)除雜蛋白等前處理之后，在一定條件下直接用熱水浸提已經(jīng)變性了的膠原蛋白或水提取膠原蛋白膠原蛋白水解物，使用的溫度有100℃沸水浴、60-70℃、40-45℃。

魚(yú)皮膠原蛋白生產(chǎn)線酸法

酸法提取是利用一定濃度的酸溶液在一定的條件下提取膠原蛋白，主要采用低離子濃度酸性條件破壞分子酸提取膠原蛋白間 鹽鍵和希夫堿，而引起纖維膨脹、溶解，采用酸法提取的膠原蛋白通常成為酸溶性膠原蛋白。酸溶解法可將沒(méi)有交聯(lián)的膠原分子溶解出來(lái)，也可溶解含有醛胺類交聯(lián) 鍵的膠原纖維，然后釋放到溶劑中。酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法，用低溫酸法提取的膠原zui大程度的保持了其三螺旋結(jié)構(gòu)，適用于科研生物材料及原 料的制備。通常的做法是將適當(dāng)濃度的酸液按一定料液比加入到經(jīng)過(guò)預(yù)處理的骨粉中，于0～25℃攪拌提取一定時(shí)間。在采用酸法進(jìn)行膠原蛋白的提取時(shí)，注意提 取溫度不宜過(guò)高，以免膠原蛋白的生物活性發(fā)生破壞。取樣經(jīng)前處理后，勻漿在低溫下用酸浸提，離心即可得酸溶性膠原蛋白（acid-soluble collagen，ASC）。作為溶劑使用的酸，主要有鹽酸、磷酸、甲酸、乙酸、蘋(píng)果酸、檸檬酸等，但大多數(shù)研究集中于乙酸抽提，像Maria Sadowska等用0.5mol/L檸檬酸在室溫下提取骨膠原蛋白，其提取率略低于乙酸提取。檸檬酸因不產(chǎn)生顏色和異味得以廣泛使用于食品工業(yè)的膠原蛋 白的提取。

酸法處理時(shí)，反應(yīng)強(qiáng)烈，水解*，多生成氨基酸混合物，而且使用酸提取時(shí)，根據(jù)酸濃度、水解溫度、水解時(shí)間等條件的 不同，可以得到分子量不均的膠原水解物。但是在即使中等濃度酸*水解過(guò)程中色氨酸也會(huì)全部被破壞，絲氨酸和酪氨酸也會(huì)部分被破壞，且設(shè)備腐蝕嚴(yán)重。因 此，酸法溶出生物科研膠原要準(zhǔn)確控制酸度、溫度、時(shí)間等影響因素。由于各種不足，酸法很少單獨(dú)使用，一般和酶法配合。比如以豬皮為原料，在檸檬酸 (pH8.6)和胃蛋白酶協(xié)同下提取膠原蛋白。在處理后的豬皮中加0.05moL/L含有胃蛋白酶的檸檬酸溶液（pH2.5-3）處理一段時(shí)間，然后再用 NaCL鹽析，zui后提取率為12.35%，提取物保持了完整三股螺旋結(jié)構(gòu)的I型膠原蛋白。還有人以雛雞胸軟骨為原材料，在0.5moL/L醋酸條件下經(jīng)胃 蛋白酶多次消化，在4℃，20000r條件下離心20min，zui后應(yīng)用DEAE-Sephadex A-50進(jìn)行離子交換層析，之后透析，再用NaCL鹽析，zui后得到純化的膠原蛋白Ⅱ型。

堿法

堿法提取即利用一定濃度的堿在一定的外界條件下提取膠原蛋白，堿處理法中常用的處理劑為石灰、氫氧

堿提取膠原蛋白工藝流程

化、鈉、碳酸鈉等，用*浸提時(shí)效果較好。一般的是把樣品勻漿后，用堿溶液多次溶脹后，再離心提取。但由于易引起蛋白質(zhì)變性，如膠原肽鍵水解，含羥基、疏 基的氨基酸全部被破壞；所得產(chǎn)物等電點(diǎn)pH值較低，天冬酞胺和谷氨酞胺分別轉(zhuǎn)變?yōu)樘於彼岷凸劝彼?，得到的水解產(chǎn)物分子量較在酸性溶液中比低等問(wèn)題，若比 較嚴(yán)重的話，還會(huì)產(chǎn)生 D、L-型氨基酸消旋混合物，若D型氨基酸含量高過(guò)L 型氨基酸，則會(huì)抑制L-型氨基酸的吸收，有些D型氨基酸有毒，甚至有致癌、致畸和致突變的作用。而且堿法提取的含量較低，用*從魷魚(yú)皮中提取堿溶性 膠原蛋白，其得率只有3%（以濕基計(jì)）。所以，若想提取結(jié)構(gòu)完整、使用安全的膠原蛋白，很少采用此方法。有關(guān)單獨(dú)采用堿法提取膠原蛋白的報(bào)道不多，一般是 堿法提取和酸法提法結(jié)合使用。比如在4℃條件下，魚(yú)骨用0.1moL/L的NaOH浸泡6h，再用2.5%NaCl浸泡6h去除雜蛋白，用10%的異丙醇 溶液去除脂肪，0.1moL/L的檸檬酸浸泡3d，zui后得到無(wú)色無(wú)味的膠原蛋白，提取率為11.87%。注意，無(wú)論酸法或堿法，均可有效地提取膠原蛋白，有人分別采用醋酸- 鹽酸的混合酸液（pH3.0）和NaOH溶液（pH12.0）提取骨膠原蛋白，提取率基本相當(dāng)。但是，這兩種方法提取膠原蛋白不僅容易影響膠原蛋白的生物 活性，而且提取后產(chǎn)生的酸性或堿性廢液必須進(jìn)行適當(dāng)處理，以避免對(duì)環(huán)境造成污染。

鹽法

鹽法提取是利用各種不同的鹽在不同的濃度條件下提取鹽溶性膠原蛋白的方法。常用來(lái)提取膠原的鹽有鹽

膠原蛋白鹽析工藝流程

酸 -三羥甲基胺基甲烷（Tris-HCl）、氯化鈉、檸檬酸鹽等。在中性條件下，當(dāng)鹽的濃度達(dá)到一定量時(shí)，膠原就會(huì)溶解在其中，但是膠原的溶解和分級(jí)受中性 鹽效應(yīng)影響，有的鹽可提高膠原的穩(wěn)定性，而有的則可降低其構(gòu)象穩(wěn)定性，從而對(duì)提取天然膠原蛋白很不利。此外，可采用不同濃度的氯化鈉對(duì)提取的膠原蛋白進(jìn)行 鹽析處理，可以沉淀出不同類型的膠原蛋白。