慢病毒載體是以人類免疫缺陷型病毒（HIV)為基礎(chǔ)發(fā)展起來的基因治療載體，能同時感染分裂細(xì)胞和非分裂細(xì)胞，并且可以整合到細(xì)胞基因組中高效表達(dá)。對于一些較難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞，如原代細(xì)胞，干細(xì)胞，不分化的細(xì)胞等，使用慢病毒載體，能大大提高外源基因的轉(zhuǎn)染效率。將重組病毒質(zhì)粒及其輔助包裝質(zhì)粒系統(tǒng)共轉(zhuǎn)染至包裝細(xì)胞中，收集富含慢病毒顆粒的細(xì)胞上清液，將其濃縮后得到高滴度的慢病毒濃縮液，在293T細(xì)胞中測定病毒滴度。

慢病毒包裝技術(shù)服務(wù)簡介

過表達(dá)慢病毒服務(wù)

過表達(dá)（cDNA）慢病毒產(chǎn)品服務(wù)是將客戶的目的基因的cDNA序列連接到不同的慢病毒載體上，通過包裝獲得過表達(dá)目的基因的慢病毒顆粒。同科生物提供的過表達(dá)慢病毒產(chǎn)品適合于人源、小鼠、大鼠等物種的基因的表達(dá)。

RNAi慢病毒服務(wù)

RNA干擾(RNA interference, RNAi) 現(xiàn)象是一種進(jìn)化上保守的抵御轉(zhuǎn)基因或外來病毒侵犯的防御機(jī)制。利用慢病毒構(gòu)建的shRNA/miRNA載體與化學(xué)合成的siRNA和基于瞬時表達(dá)載體構(gòu)建shRNA相比一方面可以擴(kuò)增替代瞬時表達(dá)載體使用，另一方面shRNA/miRNA載體經(jīng)過慢病毒包裝后，可用于傳統(tǒng)難于轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系和原代細(xì)胞等其他細(xì)胞，并且在感染后可以整合到受感染細(xì)胞的基因組，進(jìn)行長時間的穩(wěn)定表達(dá)。

慢病毒包裝技術(shù)服務(wù)內(nèi)容

慢病毒過表達(dá)cDNA服務(wù)流程：

基因調(diào)?。ǜ鶕?jù)客戶要求設(shè)計載體骨架，構(gòu)建慢病毒載體）；

病毒包裝：重組病毒質(zhì)粒與包裝質(zhì)粒一起轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞進(jìn)行包裝，濃縮純化做滴度測定。

RNAi慢病毒服務(wù)流程：

設(shè)計３個靶序列；

慢病毒載體的構(gòu)建；

慢病毒包裝純化和濃縮；

目的基因鑒定、滴度測定。

客戶提供

基因的名稱和序列，病毒載體要求與選擇；

病毒滴度和總量，以及是否需要純化；

若要檢測靶基因的表達(dá)情況，還需要提供抗體。

同科提供

提供附有測序結(jié)果的慢病毒載體質(zhì)粒；

提供測定滴度的慢病毒儲存液。

質(zhì)量保證

保證制備的病毒攜帶片段的正確性；

可提供10ml滴度為107—108/ml的病毒原液。