按照空白-500ng/mL-空白1-空白2的進(jìn)樣順序編輯序列，運(yùn)行結(jié)束后根據(jù)目標(biāo)峰的峰面積計(jì)算500ng/mL濃度之后的第一針和第二針空白的殘留水平，結(jié)果如表2所示。生物惰性儀器500ng/mL后空白1殘留%比普通Frontier殘留減少約57%。

表2 普通Frontier和生物惰性Frontier Bio Inert 儀器殘留對(duì)比表（以峰面積計(jì)算）

Frontier Bio inert LC系統(tǒng)新增多種自動(dòng)進(jìn)樣器清洗方式，更適配易殘留的多肽檢測(cè)，通過增加針清洗和閥清洗等方式殘留可降至0.1%以內(nèi)。

表3 生物惰性Frontier Bio Inert 不同進(jìn)樣器清洗程序儀器殘留對(duì)比表（以峰面積計(jì)算）

圖 1 線性最高點(diǎn)濃度500ng/mL司美格魯肽和替爾泊肽總離子流圖（TIC）

圖 2 司美格魯肽500ng/mL以及空白1殘留疊加圖

圖 3 替爾泊肽500ng/mL以及空白1殘留疊加圖

將司美格魯肽和替爾泊肽混合標(biāo)準(zhǔn)工作液1.0ng/mL，5.0ng/mL，10.0ng/mL，50.0ng/mL，100.0ng/mL，200ng/mL，500ng/mL分別進(jìn)樣分析。司美格魯肽和替爾泊肽線性結(jié)果如圖4所示，在1.0ng/mL~500ng/mL范圍內(nèi)線性良好，r2均大于0.999。

圖4 Semaglutide和Tirzepatide的標(biāo)準(zhǔn)曲線結(jié)果

重現(xiàn)性

將100ng/mL的樣品連續(xù)進(jìn)樣6次進(jìn)行重復(fù)性考察。保留時(shí)間重復(fù)性在0.07%-0.09%之間，峰面積重復(fù)性在1.24%-1.80%之間，結(jié)果如圖5和圖6所示。

圖5 司美格魯肽100ng/mL連續(xù)6針重復(fù)性結(jié)果表

圖6 替爾泊肽100ng/mL連續(xù)6針重復(fù)性結(jié)果表

本方案采用科諾美Frontier生物惰性超高效液相色譜系統(tǒng)（Frontier Bio Inert LC），該系統(tǒng)與質(zhì)譜儀聯(lián)用，采用新的自動(dòng)進(jìn)樣器清洗方式，可以有效減少乃至消除非特異性吸附，線性最高點(diǎn)500ng/mL后空白殘留在0.1%以內(nèi)，在濃度范圍1ng/mL-500ng/mL內(nèi)線性良好，線性相關(guān)系數(shù)大于0.999，重復(fù)性好，滿足多肽類藥物的測(cè)定要求。