肺癌是全球 “癌王” 級惡性腫瘤，高耐藥性、強全身毒性和差預(yù)后一直是治療難題。作為肺癌一線化療藥，多西他賽（DTX）水溶性極差，還容易讓腫瘤產(chǎn)生耐藥性，這與βIII - 微管蛋白（TUBB3）過表達(dá)直接相關(guān)。TUBB3-siRNA能通過RNA干擾下調(diào)TUBB3，本是逆轉(zhuǎn)耐藥的理想手段，卻面臨體內(nèi)外核酸酶降解、難以跨細(xì)胞膜的困境。

脂質(zhì)納米粒（LNPs）可同時包裹多西他賽和TUBB3-siRNA，是具備較大潛力的遞送載體，但其膠體溶液需低溫儲運，存在運輸不便、成本高昂的問題。此外，傳統(tǒng)干粉吸入裝置無法適配吸濕性強、穩(wěn)定性差的siRNA-LNP粉末，缺乏高效的單劑量遞送方案。因此，打造一個兼具肺靶向、緩釋性和穩(wěn)定性的協(xié)同治療平臺，搭配專用遞送裝置，成為突破肺癌治療瓶頸的關(guān)鍵。

首先，圖1展示了TUBB3/多西他賽-脂質(zhì)納米粒從液體膠體經(jīng)噴霧冷凍干燥技術(shù)制備為可吸入干粉的流程，明確了研究的核心制劑轉(zhuǎn)化路徑，為后續(xù)性能驗證奠定基礎(chǔ)。

圖例1：TUBB3/多西他賽-脂質(zhì)納米?？晌敫煞壑苽淞鞒虉D

圖例2：TUBB3/多西他賽-脂質(zhì)納米粒配方

其次，圖3呈現(xiàn)了剛制備LNPs溶液與噴霧冷凍干燥后脂質(zhì)納米粒的粒徑分布及ζ電位特征，顯示兩類脂質(zhì)納米粒粒徑均小于200nm、ζ電位接近0mV，干粉D50在1.99-5.90μm之間，證明噴霧冷凍干燥工藝未顯著改變脂質(zhì)納米粒核心理化性質(zhì)，且干粉粒徑符合肺部沉積要求。

圖例3：脂質(zhì)納米粒及干粉的粒徑與ζ電位特征

接著，圖4通過透射電子顯微鏡和掃描電子顯微鏡圖像，展示了新鮮脂質(zhì)納米粒、復(fù)水后噴霧冷凍干燥脂質(zhì)納米粒及干粉的形態(tài)，新鮮和復(fù)水脂質(zhì)納米粒均為均勻球形，干粉呈疏松多孔球形，證實噴霧冷凍干燥過程保留了脂質(zhì)納米粒結(jié)構(gòu)完整性，且干粉形態(tài)利于分散和肺部遞送。

圖例4：脂質(zhì)納米粒及干粉的形態(tài)表征

研究團(tuán)隊通過圖5結(jié)果，證明TUBB3-siRNA被A549細(xì)胞成功攝取且與脂質(zhì)納米粒外殼共定位，噴霧冷凍干燥前后siRNA結(jié)構(gòu)完整，證明脂質(zhì)納米粒可有效遞送siRNA，且噴霧冷凍干燥工藝不破壞siRNA完整性。

圖例5：脂質(zhì)納米粒細(xì)胞攝取及siRNA完整性驗證

隨后，圖6證明了TUBB3/多西他賽-脂質(zhì)納米粒對BEAS-2B細(xì)胞生物相容性好，對H460和A549細(xì)胞抑制作用顯著，凋亡率高于單藥組，TUBB3-siRNA可下調(diào)TUBB3表達(dá)、抑制p-AKT通路，揭示化療與基因治療的協(xié)同抗腫瘤機制，且噴霧冷凍干燥工藝不影響制劑生物活性。

圖例6：脂質(zhì)納米粒的細(xì)胞毒性、凋亡誘導(dǎo)及協(xié)同機制

圖7展示了單劑量干粉吸入裝置的結(jié)構(gòu)示意圖、實物圖及不同裝置的干粉排空率數(shù)據(jù)，裝置采用中部對稱四通風(fēng)口設(shè)計，排空率達(dá)95%-100%，說明該裝置結(jié)構(gòu)合理，能實現(xiàn)高效干粉遞送。

圖例7：單劑量干粉吸入裝置結(jié)構(gòu)與排空率

7. 干粉吸入裝置吸入原理及體外氣溶膠沉積

圖8呈現(xiàn)了干粉吸入裝置的吸入示意圖及體外氣溶膠在下一代撞擊器中的沉積模式，顯示制劑輸出效率>90%，質(zhì)量中值空氣動力學(xué)直徑約2.61μm，證明制劑與裝置適配性良好，具備理想的肺部遞送空氣動力學(xué)特性。

圖9實驗結(jié)果顯示由Cy5.5標(biāo)記的脂質(zhì)納米粒干粉主要富集于肺部且48小時內(nèi)持續(xù)滯留，主要器官無明顯病理損傷，證實制劑具有強肺靶向性和良好生物安全性。

最后，圖10展示了氣管內(nèi)給藥與靜脈給藥后血清及肺組織中多西他賽濃度變化、不同時間點組織分布數(shù)據(jù)，顯示氣管內(nèi)給藥組肺組織藥物濃度顯著高于靜脈給藥組，血清藥物濃度平穩(wěn)且持續(xù)時間長，證明氣管內(nèi)給藥結(jié)合制劑與裝置可實現(xiàn)肺部靶向富集和長效緩釋，降低全身暴露。