·基本定義與化學結(jié)構(gòu)
PKH 26是一種紅色熒光染料。它的特性是能與細胞膜脂質(zhì)區(qū)穩(wěn)定結(jié)合,并呈現(xiàn)紅色熒光(最佳激發(fā)/發(fā)射波長為551/567 nm)?;谶@一特性,其主要用途包括:① 細胞的體外標記;② 體外的細胞增殖分析;③ 體內(nèi)外的細胞示蹤研究。
·基本信息介紹(資料卡)
CAS號:154214-55-8
中文名稱:PKH-26(RED)外泌體示蹤染料
英文名稱:PKH 26; PKH-26 (RED);PKH-26 Red Fluorescent Cell Linker Dye
分子量 :961.32
分子式:C59H97IN2
性狀:固體
顏色:Brown to reddish brown
Emission (Em):567
Excitation (Ex):551
廠商:西安凱新生物
結(jié)構(gòu)式:

純度:≥95%
儲存條件:-20℃以下冰凍、干燥保存,避免反復(fù)凍融
安全性:
操作時需佩戴防護裝備,避免接觸皮膚和眼睛。
如不慎接觸,請立即用大量清水沖洗,并尋求醫(yī)療幫助。
·PKH 26細胞染色操作方法
(一)懸浮細胞(以6孔板為例)
細胞收集
離心:1000g,4°C,3–5分鐘
洗滌:PBS清洗2次,每次5分鐘
調(diào)整密度:1 × 10? /mL
染色
加入1 mL工作液,室溫孵育10–45分鐘
清洗
離心:400g,4°C,3–4分鐘,棄上清
PBS洗滌2次,每次5分鐘
檢測
用無血清培養(yǎng)基或PBS重懸,即可進行熒光顯微鏡觀察或流式細胞術(shù)檢測
(二)貼壁細胞(蓋玻片法)
細胞準備
將細胞培養(yǎng)于無菌蓋玻片上
染色
取出蓋玻片,吸去多余培養(yǎng)基
加入100 µL工作液,輕搖使之均勻覆蓋細胞,室溫孵育5–30分鐘
清洗與檢測
吸去工作液
用培養(yǎng)基洗滌2次,每次5分鐘
熒光顯微鏡觀察
關(guān)鍵提示
濃度優(yōu)化:工作液最佳濃度(5–10 µM范圍)需根據(jù)具體細胞類型進行預(yù)實驗確定
避光操作:染色及孵育過程中注意避光,防止熒光淬滅
對照設(shè)置:建議設(shè)置未染色的細胞作為陰性對照
·相關(guān)試劑
dU (Deoxyuridine) phosphoramidite
JOE NHS ester, 5-isomer
sulfo-Cyanine7.5 NHS ester
TFA-amino modifier CPG 500
Biotin-PEG4-carboxylic acid
LumiTracker Mito Red CMXRos
Cyanine7 maleimide
sulfo-Cyanine7.5 azide
TAMRA DBCO, 5-isomer
sulfo-Cyanine3 tetrazine
JOE azide, 5-isomer
BDP FL amine
AF 568 DBCO
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該試劑僅用于科研實驗,不可用于人體
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