Lip2000Transfection Reagent
產品貨號 | 產品名稱 | 規(guī)格 |
BL623S | Lip2000Transfection Reagent | 0.1 ml |
BL623A | Lip2000Transfection Reagent | 0.5 ml |
BL623B | Lip2000Transfection Reagent | 1 ml |
產品簡介：
Lip2000是一種新型的陽離子脂質體轉染試劑，適合于將核酸(DNA和RNA)轉染至真核細胞，具有低細胞毒性、對多種類型的細胞都具有高轉染效率、轉染時血清的存在不影響轉染效率的優(yōu)點。
適用范圍：貼壁細胞和懸浮細胞（哺乳動物細胞系）的轉染。
質粒DNA的轉染：對大多數細胞來說，DNA(µg)與Lip2000(µl)的比例為1:2~1:3。轉染時高的細胞密度可以得到高的轉染效率和表達水平，并能減少細胞毒性。
使用說明：（以 24 孔板為例）
1、細胞鋪板：
貼壁細胞：轉染前一天，用500µl不含抗生素的培養(yǎng)基接種0.5-2×105 細胞，使之第二天能達到 70-90%匯合。
懸浮細胞：在準備 DNA-Lip2000 復合物之前，用500µl不含抗生素的培養(yǎng)基接種4-8×105細胞即可。
2、對每個轉染樣品，進行以下操作
（1）在離心管里分別加入50µl無血清培養(yǎng)基（如OPTI-MEM Ⅰ 培養(yǎng)基） 和 0.8 µg DNA，輕柔混勻，制成DNA稀釋液。
（2）在另一個離心管里分別加入50µl無血清培養(yǎng)基（如OPTI-MEM Ⅰ 培養(yǎng)基）和2.0µl Lip2000（注意用前先混勻），輕柔混勻，制成 Lip2000稀釋液，室溫靜置 5 分鐘。
（3）將 DNA 稀釋液和 Lip2000 稀釋液混合，輕柔混勻，室溫靜置 20分鐘，形成DNA-Lip2000 復合物。DNA-Lip2000 復合物在室溫下可穩(wěn)定存在 6 小時。
3、將 DNA-Lip2000 復合物加入到接種好的細胞中，將培養(yǎng)板輕輕地前后搖動，使復合物分散均勻。
4、在 37℃CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 4-6 小時后更換培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)18-48 小時
5、如果要篩選穩(wěn)定細胞株，則在轉染24小時后將細胞按照1:10 或更高的比例接種到新鮮培養(yǎng)基中，第二天加入選擇性培養(yǎng)基進行篩選。
質粒 DNA 轉染的優(yōu)化：為達到*高的轉染效率和降低細胞毒性的影響，可以對 DNA 和 Lip2000 的比例以及細胞密度進行優(yōu)化，一般在1:0.5~1:5 的范圍內優(yōu)化DNA (µg) 和 Lip2000 (µl) 的比例。
保存條件：
2-4℃保存一年（避免冷凍）。
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