利用斑馬魚模型評(píng)價(jià)改善貧血功效【評(píng)價(jià)原理】

貧血是指人體外周血紅細(xì)胞容量減少，低于正常范圍下限的一種常見的臨床癥狀。斑馬魚造血系統(tǒng)的形成，包括紅系、髓系、淋系及巨核系為主的造血系統(tǒng)，其相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路同人類有高度的同源性，這些特點(diǎn)使斑馬魚在人類造血系統(tǒng)和血液疾病的研究中有著更加廣泛的應(yīng)用。由于斑馬魚早期出現(xiàn)血液循環(huán)時(shí)胚胎透明，可通過染色劑在顯微鏡直接觀察心臟紅細(xì)胞的數(shù)量。

苯肼導(dǎo)致紅細(xì)胞外翻和氧化應(yīng)激產(chǎn)生，紅細(xì)胞外翻能夠引起血細(xì)胞聚集，氧化應(yīng)激產(chǎn)生導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞損傷，進(jìn)而導(dǎo)致血小板聚集、纖維蛋白原形成，終誘導(dǎo)血栓發(fā)生。

用特異性紅細(xì)胞染色劑（呈紅色），貧血斑馬魚心臟部位的紅細(xì)胞較正常斑馬魚明顯減少，在解剖顯微鏡下可以觀察到。

利用斑馬魚模型評(píng)價(jià)改善貧血功效【實(shí)驗(yàn)方案】

我們將受測試斑馬魚分成三組，分別是正常對(duì)照組、模型對(duì)照組和服用補(bǔ)血藥物組。其中正常對(duì)照組未經(jīng)任何處理，模型對(duì)照組與服用補(bǔ)血藥物組都攝入了等量的苯肼（苯肼通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi)）。服用補(bǔ)血藥物組先攝入生血寧之類的改善貧血藥物后再攝入苯肼。

服用改善貧血藥物一段時(shí)間后，再加入苯肼共同處理一段時(shí)間后，我們對(duì)斑馬魚整體做紅細(xì)胞特異性染色，終分析斑馬魚的紅細(xì)胞信號(hào)強(qiáng)度。

【結(jié)果展示】

圖1. 斑馬魚貧血表型圖

可以看到，模型對(duì)照組紅細(xì)胞信號(hào)強(qiáng)度較正常對(duì)照組明顯減少，服用補(bǔ)血藥物組的紅細(xì)胞信號(hào)強(qiáng)度與正常對(duì)照組比較相似，沒有明顯的紅細(xì)胞減少情況。

【評(píng)價(jià)結(jié)論】

1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對(duì)比實(shí)驗(yàn)，服用補(bǔ)血藥物組的紅細(xì)胞信號(hào)強(qiáng)度與正常對(duì)照組相似，并未出現(xiàn)模型對(duì)照組紅細(xì)胞減少的情況。

2.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了生血寧具有明顯改善貧血的功效。