斑馬魚模型評價(jià)調(diào)節(jié)免疫功效中性粒細(xì)胞【評價(jià)原理】

靜脈注射給予長春瑞濱造模斑馬魚免疫力低下模型。大劑量長春瑞濱骨髓抑制明顯，導(dǎo)致血小板、紅細(xì)胞及白細(xì)胞數(shù)目（中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞等）減少和貧血，終導(dǎo)致免疫力低下人類與斑馬魚在免疫系統(tǒng)的細(xì)胞組成上極為相似，而且斑馬魚是目前所有同時(shí)具有特異性免疫和非特異性免疫動物個(gè)體中體積小的，適合高通量評價(jià)調(diào)節(jié)免疫功效。斑馬魚靜脈注射大劑量長春瑞濱后可造成免疫低下。

采用轉(zhuǎn)基因中性粒細(xì)胞綠色熒光斑馬魚，可在熒光顯微鏡在觀察到免疫力低下的斑馬魚體內(nèi)的中性粒細(xì)胞熒光強(qiáng)度明顯減弱。

斑馬魚模型評價(jià)調(diào)節(jié)免疫功效中性粒細(xì)胞【實(shí)驗(yàn)方案】

我們將受測試斑馬魚分成三組，分別是正常對照組、模型對照組和服用免疫調(diào)節(jié)劑組。其中正常對照組未注射長春瑞濱，模型對照組與服用免疫調(diào)節(jié)劑組都注射了等量的長春瑞濱（長春瑞濱通過靜脈注射的方式攝入到斑馬魚體內(nèi)）。服用免疫調(diào)節(jié)劑組在注射長春瑞濱后攝入鹽酸小檗胺等免疫調(diào)節(jié)劑。

服用一段時(shí)間免疫調(diào)節(jié)劑后，我們觀察中性粒細(xì)胞熒光強(qiáng)度變化。

【結(jié)果展示】

圖1. 斑馬魚中性粒細(xì)胞表型圖

綠色熒光顆粒代表中性粒細(xì)胞

可以看到，免疫調(diào)節(jié)劑組中性粒細(xì)胞熒光強(qiáng)度與正常對照組相似，沒有出現(xiàn)中性粒細(xì)胞熒光強(qiáng)度明顯減弱的情況。

【評價(jià)結(jié)論】

1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實(shí)驗(yàn)，免疫調(diào)節(jié)劑組中性粒細(xì)胞數(shù)量與正常對照組相似，并未出現(xiàn)模型對照組免疫力低下的情況。

2.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了鹽酸小檗胺具有增強(qiáng)免疫力的功效。