利用斑馬魚模型評價皮膚刺激性【評價原理】

與人類相似，中性粒細(xì)胞在斑馬魚體內(nèi)發(fā)揮固有免疫作用，且是體內(nèi)數(shù)量多的白細(xì)胞在炎癥反應(yīng)起始階段有一系列事件發(fā)生，如血管舒張、毛細(xì)血管網(wǎng)的通透性增強(qiáng)、炎性介導(dǎo)釋放等?；瘖y品對皮膚的刺激表型主要表現(xiàn)為皮膚炎癥，炎癥早期主要表現(xiàn)為毛細(xì)血管擴(kuò)張、通透性亢進(jìn)和水腫。刺激物進(jìn)入斑馬魚體內(nèi)，誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)，中性粒細(xì)胞發(fā)生免疫應(yīng)答，向皮膚表皮遷移并聚集。

采用轉(zhuǎn)基因中性粒細(xì)胞綠色熒光斑馬魚，可在熒光顯微鏡在觀察到皮膚受刺激的斑馬魚皮膚上的中性粒細(xì)胞明顯增多。

利用斑馬魚模型評價皮膚刺激性【實驗方案】

我們將受測試斑馬魚分成兩組，分別是正常對照和供試品組（供試品通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi)）。

皮膚吸收供試品一段時間后，我們在顯微鏡下觀察斑馬魚皮膚上中性粒細(xì)胞數(shù)量（頭部、心臟和血管中的中性粒細(xì)胞除外）。

【結(jié)果展示】

圖1. 斑馬魚皮膚刺激性表型圖

綠色光點為中性粒細(xì)胞，綠色熒光越多，中性粒細(xì)胞越多，皮膚刺激性越強(qiáng)

可以看到，供試品組斑馬魚皮膚上中性粒細(xì)胞數(shù)量明顯增加。

【評價結(jié)論】

1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實驗，攝入供試品組的斑馬魚皮膚上中性粒細(xì)胞明顯增多，與正常對照組存在明顯的差別。

2.本實驗證實了該十二烷基磺酸鈉（SLS）和甲基異噻唑啉酮對斑馬魚有皮膚刺激性。