利用斑馬魚(yú)模型評(píng)價(jià)肝臟毒性

【評(píng)價(jià)原理】

斑馬魚(yú)的基因與人類基因的相似度達(dá)到87％，斑馬魚(yú)肝臟中有許多與哺乳動(dòng)物同源的脂質(zhì)代謝酶，與哺乳動(dòng)物對(duì)外源化學(xué)物質(zhì)的防御機(jī)制相當(dāng)，包括酶的誘導(dǎo)和氧化應(yīng)激。而且斑馬魚(yú)幼魚(yú)通體透明，容易觀察到毒性表型。

我們?cè)u(píng)價(jià)斑馬魚(yú)肝臟毒性有4個(gè)指標(biāo)：1.肝臟面積；2.肝臟變性程度；3. 卵黃囊吸收延遲的發(fā)生率（卵黃囊是脂肪，卵黃囊吸收與肝功能密切相關(guān)）；4. 肝臟病理切片。

【實(shí)驗(yàn)方案】利用斑馬魚(yú)模型評(píng)價(jià)肝臟毒性

我們將受測(cè)試斑馬魚(yú)分成兩組，分別是正常對(duì)照和服用/注射供試品組（供試品通過(guò)溶解到養(yǎng)魚(yú)用水中或注射的方式攝入到斑馬魚(yú)體內(nèi)）。

服用/注射藥物一段時(shí)間后，我們觀察斑馬魚(yú)肝臟及卵黃囊表型，同時(shí)制作成病理切片觀察肝臟的病理結(jié)構(gòu)變化。

【結(jié)果展示】

圖1. 斑馬魚(yú)肝臟毒性表型圖

可以看到，服用/注射供試品組斑馬魚(yú)肝臟腫大、變性、卵黃囊吸收延遲。

圖2. 斑馬魚(yú)肝臟病理切片

綠色箭頭指向紅細(xì)胞淤積

從病理切片中可見(jiàn)，正常對(duì)照組肝組織結(jié)構(gòu)規(guī)則，肝細(xì)胞形態(tài)完整，細(xì)胞質(zhì)均勻，細(xì)胞核呈規(guī)則圓形，位于細(xì)胞中央；服用/注射供試品組的斑馬魚(yú)肝臟紅細(xì)胞淤積嚴(yán)重，細(xì)胞腫脹現(xiàn)象嚴(yán)重，細(xì)胞核變形，位于細(xì)胞邊緣，局部可見(jiàn)炎性浸潤(rùn)，壞死。

【評(píng)價(jià)結(jié)論】

1. 經(jīng)過(guò)每組30尾斑馬魚(yú)的對(duì)比實(shí)驗(yàn)，服用/注射供試品組的斑馬魚(yú)肝臟產(chǎn)生明顯的毒性表型且組織病理學(xué)改變，與正常對(duì)照組存在明顯的差別。

2. 本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了該供試品對(duì)斑馬魚(yú)有肝臟毒性。