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Pierce™ 直接磁性 IP/Co-IP 試劑盒

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產(chǎn)品型號Thermo Scientific

品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

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更新時間：2024-08-11 07:26:52瀏覽次數(shù)：351次

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經(jīng)營模式：生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品：1323條

所在地區(qū)：上海上海市

聯(lián)系人：Tracy （市場）

產(chǎn)品簡介

Pierce™ 直接磁性 IP/Co-IP 試劑盒

詳細介紹

Thermo Scientific Pierce 直接磁性 IP/Co-IP 試劑盒使用 NHS 化學(xué)將 IP 抗體共價固定在磁珠上，以實現(xiàn)有效的免疫沉淀和免疫共沉淀。

磁性 IP 與 NHS 化學(xué)較便利，可實現(xiàn)從任何種類和亞型中固定 IP 抗體，在使用蛋白 A 和蛋白 G 時觀察到的偶聯(lián)效率方面無變化。IP 抗體為共價連接，因此可以洗脫和分析靶蛋白或 co-IP 蛋白復(fù)合物，不會產(chǎn)生抗體污染。該試劑盒包含優(yōu)化的方案以及使用手動磁力架或自動平臺（如 Thermo Scientific KingFisher 儀器）實現(xiàn)抗體偶聯(lián)和高得率 IP 或 co-IP 所必需的所有緩沖液和試劑。

直接磁性 IP/Co-IP 試劑盒的特點：

•無抗體 IP—抗體與磁珠不可逆地連接，使得完整抗體或重鏈和輕鏈與純化抗原的共洗脫可忽略不計
• 快速—在不到 4 小時完成完整抗體結(jié)合和免疫沉淀
• 便利—IP/co-IP 試劑盒包含磁珠以及所有用于理想免疫沉淀所必需的緩沖液
• 抗體兼容—可與任何抗體種類、類別或同種型配合使用
• 低非特異性結(jié)合—對微珠表面進行預(yù)封閉，所有未反應(yīng)的 NHS 酯基團均被淬滅
• 方案兼容—可手動或通過自動化操作（如 Thermo Scientific KingFisher 儀器）進行與微珠的蛋白偶聯(lián)及免疫沉淀
• 可擴展—僅使用進行單次 IP 實驗所需的抗體量或制備更多數(shù)量的抗體磁珠進行多次實驗

Pierce 直接 IP/Co-IP 試劑盒方案可通過 NHS 酯化學(xué)將 IP 抗體偶聯(lián)至 Pierce NHS 活化磁珠。然后將抗體結(jié)合微珠與淬滅緩沖液一起孵育，以阻斷剩余的活性 NHS 位點。將制備的抗體結(jié)合微珠與含有目標蛋白抗原的細胞裂解物或組織提取物一起孵育，可以使抗原:抗體復(fù)合物形成。洗滌微珠以去除未結(jié)合的材料，并使用低 pH 值洗脫緩沖液從抗體結(jié)合微珠分離結(jié)合的抗原。包括中和緩沖液，以防止分離抗原沉淀，并確保下游應(yīng)用中的蛋白活性。包含用于制備 SDS-PAGE 分析樣品的泳道標志物樣品緩沖液。該方案針對 2 至 10μg IP 抗體/檢測進行了優(yōu)化。為獲得 co-IP 得率，使用 10μ g 抗體?？墒褂么帕苁謩犹幚砘蚴褂?Thermo Scientific KingFisher Flex 等儀器通過自動化操作處理磁珠。

傳統(tǒng) IP（含 蛋白 A/G 磁珠），涉及抗體與蛋白 A/G 的被動、非共價偶聯(lián)，通?？商峁┍?IP 方案（涉及通過交聯(lián)或 NHS 酯化學(xué)進行的抗體與磁珠共價結(jié)合）更高的抗原得率。共價結(jié)合不可避免地會引起一些功能性抗體結(jié)合位點的損失。為了克服 NHS 化學(xué)的這一限制，可能需要在直接 IP 方法中使用比等效傳統(tǒng) IP 方法更多的 IP 抗體量。通過 IP 抗體與磁珠共價結(jié)合實現(xiàn)免疫沉淀的優(yōu)勢在于這是一種不含干擾抗體條帶的 Western 印跡和凝膠。

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