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GeneArt™ 無縫克隆和組裝試劑盒

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更新時間：2024-08-09 07:11:01瀏覽次數(shù)：384次

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產品簡介

GeneArt™ 無縫克隆和組裝試劑盒

詳細介紹

GeneArt™ 無縫克隆和組裝試劑盒可在單次 30 分鐘室溫反應中將由任一序列組成的 1 至 4 個 PCR 片段同時定向克隆至任一線性化載體中。該試劑盒包含 DNA 片段組裝以及將其轉化至大腸桿菌以供重組載體選擇和生長所需的所有試劑。

•快速容易—可在單個載體（長達 13 Kb）中同時克隆多達 4 個 DNA 片段（含有您選擇的序列）；無需限制性酶切、連接或重組位點
•精確高效— 旨在使您能夠以您所需的方向在您所需的位點克隆您所需的片段，并且可獲得高達 90% 的正確克隆，并且不會留有額外序列
•載體靈活性— 使用我們的線性載體或您選擇的載體
•免費工具— 使用我們可逐步引導您完成計劃的免費網絡界面設計 DNA 寡核苷酸等
•多種應用— 通過快速組合、添加、刪除或交換 DNA 片段來簡化多種合成生物學和分子生物學技術

對于超過 4 個 DNA 片段的克隆、最終分子大于 110 Kb 的情況或者使用的預先存在的 DNA 元件太長以致無法通過 PCR 進行擴增；請考慮使用 GeneArt™ 高階遺傳組裝系統(tǒng)（貨號 A13285）。

簡單快速的克隆創(chuàng)建
GeneArt™ 無縫克隆是一種簡單的兩步流程，包括基于試管的組裝反應以及隨后轉化至 One Shot™ 化學感受態(tài) 0 大腸桿菌的過程。該試劑盒利用專有酶混合物的特性組裝具有共享末端同源性的 DNA 片段，并且不會留下任何額外序列或痕跡（無縫）。然后，將組裝反應的一部分轉化至提供的感受態(tài) 0 細胞中，從而生成可用于次日分析的克隆。通過使用定制 DNA 寡核苷酸進行 PCR 擴增可輕松設計所需的 15 個堿基對的末端同源性。

高效、靈活和精確的克隆
使用 GeneArt™ 無縫克隆和組裝試劑盒時，影響克隆效率的主要因素是 DNA 元件大?。?00 bp 至 5 Kb）、總最終分子大小 (≤ 13 Kb) 以及片段的質量和特異性。PCR 片段的末端（A 突出端或平末端）不會影響克隆效率。

克隆至 pUC19L 的不同片段數(shù)量的典型克隆效率如下所示：
•對于單個 5 Kb DNA 元件，90%
• 對于 4 個片段（各 1 Kb），70%
• 對于 4 個 DNA 片段（各 2 Kb），40%

克隆成功與否與插入片段序列和載體類型無關，您可以設計并添加幾乎所有所需的序列或序列組合至任何質粒中，前提是質?？赏ㄟ^限制性內切酶酶切或者 PCR 進行線性化。從反應中獲得的環(huán)形克隆僅包含您的原始載體序列、插入片段和的同源性，無無關核苷酸插入。

電腦模擬克隆設計支持
GeneArt™ 無縫克隆中的一個關鍵步驟是具有適當同源性和間距的片段和寡核苷酸的正確設計，以幫助確保克隆成功組裝。為簡化和加速設計流程，我們提供了一種免費在線工具來幫助您通過電腦模擬設計實驗。該工具可檢查實驗設計與產品規(guī)格的兼容性，設計具有末端同源性的 DNA 寡核苷酸用于進行克隆的不同元件的 PCR 擴增，并向用戶展示載體的圖形表示以及與 Vector NTI™ 軟件兼容的 GenBank 格式的可下載注釋序列。

應用
GeneArt™ 無縫克隆和組裝試劑盒設計用于在多種分子生物學和合成生物學等應用中進行克隆和 DNA 組裝實驗。該產品可用于創(chuàng)建帶有可替換部分的模塊化表達載體，還可用于執(zhí)行在其他方面可能涉及多個步驟的多種任務。使用試劑盒以簡化：構建融合蛋白、在現(xiàn)有載體中刪除、替換或添加 DNA 元件（如限制性位點）以及許多其他需要處理基因序列的技術。

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.

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