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體外細胞毒性試驗陽性對照品

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

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所  在  地深圳市

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更新時間:2025-08-20 16:30:20瀏覽次數(shù):214次

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經(jīng)營模式:經(jīng)銷商

商鋪產(chǎn)品:58條

所在地區(qū):廣東深圳市

聯(lián)系人:武浩 (經(jīng)理)

產(chǎn)品簡介

體外細胞毒性試驗陽性對照品由Hatano Research institute (HRI) 研究生產(chǎn),廣泛應(yīng)用于體外細胞毒性實驗,可以滿足中國藥典-細胞毒性檢查方法、ISO 10993和YBB 00012003細胞毒性檢查法的參數(shù)要求。

詳細介紹

體外細胞毒性試驗陽性對照品由Hatano Research institute  (HRI) 研究生產(chǎn),廣泛應(yīng)用于體外細胞毒性實驗,可以滿足中國藥典-細胞毒性檢查方法、ISO 10993和YBB 00012003細胞毒性檢查法的參數(shù)要求。


體外細胞毒性試驗陽性對照品使用常規(guī)培養(yǎng)基進行浸提。浸提方法如下:無菌操作,取1g體外細胞毒性試驗陽性對照品放置于15mL無菌離心管中,按照3mL/g浸提比例加入浸提介質(zhì)培養(yǎng)基,水平放置振蕩,120rpm,37℃條件下浸提24h。浸提結(jié)束后上下顛倒混勻10次,取浸提液用于試驗。浸提所用的培養(yǎng)基作為空白對照。注意配制好的培養(yǎng)基在4℃條件下貯存不超過兩周。體外細胞毒性試驗采用MTT法進行檢測:取狀態(tài)良好的L929細胞,消化離心,配制成細胞懸液,接種于96孔培養(yǎng)板。每組設(shè)立多個復(fù)孔,每孔接種100µL細胞懸液,置37℃、5%二氧化碳的CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h。棄去原培養(yǎng)基,加入100µL浸提液、空白對照液,于CO2培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。24h后,于顯微鏡下觀察細胞形態(tài)。棄去孔內(nèi)液體,每孔加入50µL1mg/mL的無菌MTT溶液(MTT用MEM培養(yǎng)基配置,現(xiàn)用現(xiàn)配,不可用培養(yǎng)基配制),繼續(xù)培養(yǎng)2h后棄去孔內(nèi)液體,加入100µL異丙醇,振蕩混勻,在570nm和650nm波長下測定吸光度,計算細胞存活率。


細胞毒性試驗是利用體外細胞培養(yǎng)的方法評價生物材料或浸提液潛在的細胞毒性,是生物材料生物學(xué)評價體系中重要的測定指標之一,也是生物材料必須進行檢測的項目。細胞毒性試驗?zāi)茉诙唐趦?nèi)測試生物材料對細胞代謝功能的影響,可以快速篩選材料是否具有潛在的細胞毒性。


細胞毒性試驗作為檢測生物材料毒性的手段,具有簡便、敏感性高、成本低、試驗周期短等優(yōu)點,廣泛用于生物材料產(chǎn)品的生物相容性檢測和評價手段。對生物材料細胞毒性的評價方法從觀察細胞的形態(tài)和數(shù)量變化,發(fā)展到對細胞的粘附、增殖、代謝等方面的評價,以有活力的細胞數(shù)和細胞增殖能力作為評價生物材料細胞生物相容性的評價方法。具體的試驗有中性紅攝取試驗、克隆形成試驗、MTT細胞毒性試驗和XTT細胞毒性試驗等方法,其中以MTT和XTT細胞毒性試驗方法,由于可以定量測定材料的細胞毒性,因此更為被大家接受并且應(yīng)用也更為廣泛。


MTT和XTT細胞毒性試驗檢測原理為活細胞線粒體中琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結(jié)晶甲臢(Formazan)并沉積在細胞中,而死細胞無此功能。二甲基亞砜(DMSO)或異丙醇或吩嗪硫酸甲酯(PMS)能溶解細胞中的甲臢結(jié)晶,用酶標儀在570nm波長處測定其光吸收值,在一定細胞數(shù)范圍內(nèi),結(jié)晶形成的量與細胞數(shù)成正比。根據(jù)測得的吸光度值(OD值),來判斷活細胞數(shù)量,OD值越大,細胞活性越強,毒性越小。通過計算細胞的增殖率,可以定量分級評價材料及其制品的細胞毒性。也可以通過浸提液的不同濃度稀釋情況下細胞的存活度計算IC50(細胞活度抑制50%的濃度),評價生物材料及其制品的細胞毒性。


體外細胞毒性試驗陽性對照品具有批次重現(xiàn)性好,性能穩(wěn)定、規(guī)格大小豐富的特點,可以作為生物學(xué)評價-細胞毒性測定的理想材料。


關(guān)鍵詞:對照品 離心管 顯微鏡

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