超濾管是一種實(shí)驗(yàn)室中常用耗材，主要用于分離和富集生物分子，如蛋白質(zhì)、DNA、RNA等。它也可以用于BUFFER置換，廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、分子生物學(xué)、生化等領(lǐng)域的研究中。潤(rùn)度生物UCT超濾離心管是一種優(yōu)秀的超濾管產(chǎn)品，具有的設(shè)計(jì)和優(yōu)點(diǎn)，下面將對(duì)其進(jìn)行詳細(xì)介紹。
潤(rùn)度生物UCT超濾離心管具有快速超濾功能。通過(guò)加大膜面積，小傾角結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)能夠達(dá)到較高的濃縮倍數(shù)，輕松實(shí)現(xiàn)從稀釋和復(fù)雜的混和樣本中濃縮回收目的產(chǎn)物。選擇合適的超濾管是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵，而潤(rùn)度生物UCT超濾管正是滿(mǎn)足這一需求的一款優(yōu)秀產(chǎn)品。
應(yīng)用
1. 除鹽、滲慮或更換緩沖液
2. 濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸(單株或雙株 DNA/RNA樣本)、微生物、洗出液和凈化樣本的生物樣本
3. 凈化組織培養(yǎng)基提取液和細(xì)胞溶解液中的大分子成分，從反應(yīng)混合液中去除引物、連接或分子標(biāo)記，在HPLC之前去除蛋白質(zhì)
產(chǎn)品選型表：
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 |
UCT100 | 100KD超濾管 | 96/箱(2/包24/盒) |
UCT050 | 50KD超濾管 | 96/箱(2/包24/盒) |
UCT030 | 30KD超濾管 | 96/箱(2/包24/盒) |
UCT010 | 10KD超濾管 | 96/箱(2/包24/盒) |
UCT005 | 5KD超濾管 | 96/箱(2/包24/盒) |
技術(shù)參數(shù)：
不同膜的截留分子量 （MWCO） | 建議使用比要截留的蛋白質(zhì)小2~3倍的規(guī)格 |
超濾膜材質(zhì) | modified polyethersulfone |
濃縮波保留管材質(zhì) | modified methyl methaciylate-acrylonitrile- butadiene- styreneplastic |
濾液接收離心管材質(zhì) | modified polypropyle |
離心管蓋子材質(zhì) | modified polyethylene |
有效膜面積 | 9.5cm2 |
長(zhǎng)度 | 11.8cm |
直徑 | 3.5cm |
上樣量 | 12ml |
操作溫度范圍 | 0-50℃ |
使用pH范圍 | 1-14 |
離心力 | 5000xg |
滅菌 | 本超濾管未滅菌，如需無(wú)菌建議使用70%乙醇或者紫外輻照滅菌。 |
不同規(guī)格超濾管使用條件（蛋白樣本、核酸樣本）
MWCO | 推薦離心力 | 分子量 | 堿基對(duì) | 堿基 |
3K | 3000-5000 xg | 10k-20k | 16-32 bp | 32-65 bs |
5K | 3000-5000 xg | 15k-45k | 25-78 bp | 48-143 bs |
10K | 3000-5000 xg | 30k-90k | 50-145 bp | 95-285 bs |
30K | 3000-5000 xg | 90k-180k | 145-285 bp | 285-570 bs |
50K | 3000-5000 xg | 150k-300k | 285-475 bp | 570-950 bs |
100K | 1500-3000 xg | >300k | 475-1450 bp | 950-2900 bs |
實(shí)驗(yàn)流程
注意:下列步驟為針對(duì)各標(biāo)準(zhǔn)品制定的截流及回收率流程，使用者可根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)的需求進(jìn)行優(yōu)化。
1. 使用超濾管前，請(qǐng)先使用PBS或者蒸餾水潤(rùn)洗。此步驟可以濃縮倍數(shù)。
2. 加入待離心樣本，上樣量為12mL。將蓋子擰好后把超濾管放置于離心機(jī)內(nèi)。將濃縮液保留管側(cè)面透明處朝向轉(zhuǎn)子中心(正視為V型結(jié)構(gòu))。此步驟可以提高效率，減少離心時(shí)間。另請(qǐng)注意配平以免損壞離心機(jī)。
3. 開(kāi)始離心，時(shí)間及離心力根據(jù)不同規(guī)格超濾管而定，具體推薦時(shí)間及截留效果參見(jiàn)下列表格。
4. 離心結(jié)束后，如果樣本為蛋白質(zhì)溶液，可以使用分光光度計(jì)在280 nm波長(zhǎng)處對(duì)濾液以及濃縮液進(jìn)行測(cè)量。根據(jù)離心前樣本濃度，離心后濾液及縮液濃度計(jì)算截留率和回收率。如果樣本為核酸片段，可以使用 260 nm波長(zhǎng)測(cè)量。
MWCO | 標(biāo)準(zhǔn)蛋白（濃度） | 分子量 | 離心時(shí)間 | 截留率（%） |
3k | lysozyme(0.25 mg/mL) | 14 kDa | 90 min | >90 |
5k | lysozyme(0.25 mg/mL) | 14 kDa | 90 min | >90 |
10k | lysozyme(0.25 mg/mL) | 14 kDa | 15 min | >85 |
30k | BSA (1 mg/mL) | 66 kDa | 15 min | >95 |
50k | BSA (1 mg/mL) | 66 kDa | 15 min | >85 |
50k | lgG (0.7 mg/mL) | 150 kDa | 15 min | >90 |
100k | lgG (0.7 mg/mL) | 150 kDa | 20 min | >85 |
100k | Thyroglubulin (1 mg/mL) | 776 kDa | 30 min | >90 |
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