大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)原理

　　基于雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)技術(shù)，具體流程如下：

　　固相抗體包被?

　　微孔板預(yù)先包被抗VEGF-C單克隆抗體，形成固相捕獲抗體?。

　　抗原-抗體結(jié)合?

　　加入待測(cè)樣本(如血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清)，樣本中的VEGF-C與固相抗體特異性結(jié)合，形成“固相抗體-VEGF-C"復(fù)合物?。

　　酶標(biāo)抗體反應(yīng)?

　　加入生物素標(biāo)記的抗VEGF-C多克隆抗體(檢測(cè)抗體)，與已結(jié)合的VEGF-C結(jié)合，形成“固相抗體-VEGF-C-酶標(biāo)抗體"夾心結(jié)構(gòu)?。

　　信號(hào)檢測(cè)?

　　洗滌去除未結(jié)合物質(zhì)后，加入過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素(鏈霉親和素-HRP)?。

　　加入底物TMB(四甲基聯(lián)苯胺)，HRP催化TMB顯色(藍(lán)色→黃色)，顏色深淺與VEGF-C濃度成正比?。

　　酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值)，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本濃度?。

　　關(guān)鍵特性?：

　　檢測(cè)范圍通常為15.6–1000pg/ml?。

　　特異性針對(duì)VEGF-C亞型(如大鼠VEGF-C164)，避免與其他VEGF家族成員交叉反應(yīng)?。

　　適用于科研實(shí)驗(yàn)，不可用于臨床診斷?。

　　注意事項(xiàng)?：

　　樣本需避免反復(fù)凍融，血清/血漿樣本需使用無(wú)熱原試管收集?。

　　實(shí)驗(yàn)重復(fù)性要求板內(nèi)變異系數(shù)<10%，板間<15%?。

　　注：僅供科研使用，以上資料供參考，如需具體產(chǎn)品說(shuō)明請(qǐng)咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。

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