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ELISA試劑盒常見問題
ELISA試劑盒是免疫檢測領(lǐng)域常用工具,實驗中常見問題可按照結(jié)果異常類別總結(jié),包含對應(yīng)的原因及解決方案:
1.高背景/非特異性染色(整板均勻發(fā)黃/背景過高)

2.全板無顏色(白板)

3.顯色淡/信號強度弱

4.標(biāo)準(zhǔn)曲線不佳/重復(fù)性差

5.其他常見問題
稀釋后樣本OD值高于原液?:血清存在基質(zhì)效應(yīng),封閉捕獲抗體降低回收率,按說明書要求用試劑盒自帶抗基質(zhì)稀釋液至少稀釋1倍即可改善。
?標(biāo)曲顯色過強無梯度?:主要原因為洗板不充分,手動洗板需每孔加350μl洗液靜置90秒后拍干,機器洗板需確認(rèn)針頭無堵塞、加液量充足。
?無陽性樣本信號?:優(yōu)先確認(rèn)樣本保存是否妥當(dāng)(蛋白建議-80℃凍存,新鮮樣本優(yōu)先立即檢測),可適當(dāng)稀釋樣本降低基質(zhì)效應(yīng),或嘗試4℃過夜孵育提升結(jié)合效果。
注:以上科研產(chǎn)品資料供參考,具體可咨詢技術(shù)老師!
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