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如何用酶聯(lián)免疫分析試劑盒做elisa方法/步驟總結(jié)
相信很多同學(xué)及老師在實驗中都會接觸到elisa的學(xué)習(xí),elisa的操作,其實簡單易懂,今BUNSEN本生給大家講解如何用酶聯(lián)免疫分析試劑盒做eliasa的講解:
方法/步驟總結(jié):
1、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)孔和樣孔,各加不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品,分別設(shè)空白孔,待測樣品孔。在酶標(biāo)包被版上待測樣品孔中先加樣品稀釋液,再加待測樣品。加樣時盡量不觸及孔壁

2、每個孔加入酶標(biāo)試劑,空白孔除外,用封板膜封板后置于37°C溫育60分鐘,而后配液,將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
3、小心揭掉封板膜,丟棄掉液體,甩干,每個孔中加滿洗滌液,靜置30秒后丟棄掉,如此重復(fù)5次,每次清洗后都要拍干
4、每個孔先加入顯色劑A,而后加入顯色劑B,輕輕的震蕩混勻,37°C避光顯色15分鐘(可放在37°C恒溫箱中進行避光處理)
5、每個孔加終止夜,終止反應(yīng),此時可以看到液體的顏色由藍(lán)色立馬轉(zhuǎn)為黃色,且黃色較淡,如圖中所顯示的顏色所示
6、在加終止夜的15分鐘以內(nèi),以空白孔凋零,450nm波長依序測量各孔的吸光度OD值,以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,就可進行計算了。
注:以上僅供參考!
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