知識講解：培養(yǎng)基保存條件及相關(guān)滅菌的有關(guān)問題
 

　　培養(yǎng)基的保存條件：

　　1.建議按照產(chǎn)品說明書的要求放置在推薦的儲存條件。

　　2.干粉培養(yǎng)基：即使能一定程度上抵御光和濕度，但是建議客戶還是存放在干燥避光的環(huán)境。干粉的最佳儲存溫度是15-25 °C (59-77 °F)。長時間存放導(dǎo)致的pH值變化可能通過酸堿調(diào)節(jié)。干粉培養(yǎng)基是容易吸濕的，所以瓶蓋應(yīng)該盡量保持蓋緊。吸水后的干粉可能導(dǎo)致pH變化并且結(jié)塊。明顯結(jié)塊且不易用藥匙壓碎的干粉培養(yǎng)基不建議繼續(xù)使用，因?yàn)閮?nèi)部化學(xué)成分可能發(fā)生變化。

　　3. 對于配好的培養(yǎng)基，溫度是4-12°C且避光保存。裝在密閉容器或密封袋中避免污染和水分流失。含有血、蛋黃等高營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基應(yīng)該放在2-8°C 存放。放入密閉容器前的平板需要保持干燥并且溫度不能太高。否則在密閉容器中產(chǎn)生太多凝結(jié)水會導(dǎo)致污染。失水超過15%的瓊脂可能影響微生物生長，尤其可能影響革蘭氏陰性菌。液體培養(yǎng)基過度失水也會導(dǎo)致某些成分的沉淀和結(jié)晶。

　　培養(yǎng)基滅菌問題：

　　1.培養(yǎng)基的配制是否都需要高壓滅菌，多長時間比較合適?

　　培養(yǎng)基配制方法，建議首先參考產(chǎn)品說明書指示的配制、滅菌操作的指示，進(jìn)行操作。

　　含有瓊脂的干粉培養(yǎng)基需要加熱煮沸，因?yàn)榄傊娜茳c(diǎn)在96°C左右。需要保證各成分充分混勻。熱水溶解無法代替加熱煮沸。培養(yǎng)基未煮沸狀態(tài)為渾濁，隨著加熱煮沸，顆粒溶解，培養(yǎng)基會變澄清，且不含有塊狀。一般培養(yǎng)基沸騰后，觀察到澄清，且沒有明顯的不溶塊狀或膠狀物即可。

　　有些培養(yǎng)基含有溫度敏感的成分，不能高壓滅菌，因此在操作上需要格外注意，需要參考說明書的具體操作。

　　2.已經(jīng)輻照滅菌的培養(yǎng)基還能高溫高壓再滅菌嗎?

　　已經(jīng)輻照滅菌的培養(yǎng)基，通常不建議再高溫高壓滅菌或其他加熱手段。如果無菌模擬灌裝實(shí)驗(yàn)需要模擬過濾滅菌以及高溫高壓蒸汽滅菌的兩個過程，通常滅菌后的培養(yǎng)基仍然能夠提供足夠營養(yǎng)以保證微生物生長，但是強(qiáng)烈建議使用者在模擬過程中加測微生物促生長實(shí)驗(yàn)。

　　3.干粉或顆粒培養(yǎng)基使用說明書中121℃滅菌15分鐘是指滅菌的過程時長嗎?

　　培養(yǎng)基說明書中121℃滅菌15分鐘是指高壓蒸汽滅菌法，在溫度達(dá)到121℃，持續(xù)滅菌15min。建議首先確認(rèn)滅菌設(shè)備的原理為高壓蒸汽滅菌法，而且滅菌過程是符合相關(guān)滅菌效果驗(yàn)證的，以確保培養(yǎng)基得到有效滅菌。

　　備注：以上信息僅供參考，具體信息說明及操作以廠家說明書為準(zhǔn)。

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