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厭氧培養(yǎng)箱操作室厭氧環(huán)境形成

 操作室厭氧環(huán)境形成
1 按使用要求放置好必要的配件和器具，并向操作室內(nèi)放入二個(gè)無(wú)毒塑料袋。
2 通電源開(kāi)照明燈，開(kāi)控溫儀，調(diào)節(jié)所需溫度及安全溫度。
3 操作室內(nèi)放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入美蘭指示劑(封閉)。
4 關(guān)緊取樣室內(nèi)外門(mén)，并抽真空校驗(yàn)。
5 操作室內(nèi)次置換（氮?dú)庵脫Q）：
（1）先用橡皮管插入操作室內(nèi)進(jìn)氣口，另一頭插入塑料袋。
（2）接通氮?dú)膺M(jìn)氣路，打開(kāi)氮?dú)饪刂崎y，使二只塑料袋充足氮?dú)?，然后扎緊袋口。
（3）把乳膠手套套在觀(guān)察板法蘭圈上并扎緊。
（4）把塑料袋內(nèi)氮?dú)鉂u漸地放于操作室內(nèi)，至全部放出。
6 操作室D二次置換（氮?dú)庵脫Q）重復(fù)一 次充氮過(guò)程，并注意隨時(shí)用腳踏開(kāi)關(guān)開(kāi)閉排氣。
7 操作室D三次置換（混合氣體置換）：
（混合氣體配比為：N2↑ 85% H2 ↑ 10% CO2↑ 5%）
（1）調(diào)換氣路打開(kāi)混合氣道通閥門(mén)進(jìn)氣，充氣時(shí)要隨時(shí)腳踏開(kāi)關(guān)開(kāi)閉排氣。
（2）混合氣充滿(mǎn)塑料袋后，關(guān)掉混合氣直通閥（三通閥），使混合氣經(jīng)過(guò)流量計(jì)輸入操作并調(diào)整流量計(jì)，流量為每分鐘10毫升左右。
（3）把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi)。
（4）通過(guò)三次換氣后，操作室內(nèi)氣體含氧量已處于微量狀態(tài)。
8 操作室內(nèi)打開(kāi)鈀粒除氧劑，接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧，一 小時(shí)后打開(kāi)美蘭指示劑（美蘭安瓶）觀(guān)察其變色，不變色為操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境。
9 開(kāi)紫外線(xiàn)滅菌燈，室內(nèi)進(jìn)行滅菌處理。滅菌時(shí)間自定。
二、菌種的置入和培養(yǎng)
1 檢查取樣室內(nèi)門(mén)并關(guān)緊之。
2 打開(kāi)取樣室外門(mén)，將菌種放入取樣室后即關(guān)上外門(mén)。
3 取樣室充氮置換三次過(guò)程：先抽真空度500毫米汞柱（66Kpa）以上停,然后人工打開(kāi)氮?dú)忾y門(mén)進(jìn)氣,使指針回復(fù)零位后進(jìn)行下次操作。
4 如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù)。
5 取樣室內(nèi)外門(mén)開(kāi)啟，關(guān)緊要抽低真空度100毫米汞柱（13 Kpa）檢驗(yàn)及幫助操作。