使用層析柱,有技巧可事半功倍
層析柱就是通常所說色譜柱,屬于色譜法中使用廣泛的一種方法。對于含有多種有機(jī)物的混合樣品,用重結(jié)晶無法提純時(shí),可以說是有機(jī)實(shí)驗(yàn)中有效的分離手段。
根據(jù)多年來使用柱層析的操作經(jīng)驗(yàn),本文總結(jié)了在使用柱層析時(shí)的幾個(gè)技巧:
初做柱層析很容易把柱子裝得長了或短了,有時(shí)還會(huì)有大量的硅膠剩余,浪費(fèi)硅膠,這主要是對硅膠等固定相的使用的量沒有掌握。柱層析用的硅膠一般是100-200目,100毫升硅膠的質(zhì)量在47克左右,如果裝一個(gè)直徑是2.8厘米的柱子,可以裝18厘高。
為了避免浪費(fèi)硅膠和溶劑,初學(xué)習(xí)裝柱時(shí)要對實(shí)驗(yàn)室中各種不同規(guī)格的柱子摸摸底。方法很簡單:用量筒量出100毫升干硅膠,直接倒入各種規(guī)格的柱子中,敲實(shí),用刻度尺量出硅膠在柱子中的高度,這樣就可以做到心中有數(shù)了。
一般在裝柱的時(shí)候可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)所需柱子的高度來調(diào)整硅膠的使用量,這樣就可以大大地節(jié)省硅膠的使用,避免造成沒有必要的浪費(fèi)。稱量硅膠時(shí)一般稱30~70倍于上樣量,如果極難分,也可以用100倍量以上的硅膠。
隨著科技的發(fā)展,色譜法的技術(shù)也日新月異,但柱層析實(shí)驗(yàn)技術(shù)還是比較簡單和實(shí)用的,每個(gè)科研工作者在使用層析柱時(shí),可以根據(jù)自己的實(shí)際情況來不斷地摸索,不斷地總結(jié)和提高柱層析的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。
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