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HiPuri Beads全血基因組DNA提取磁珠試劑盒

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  • 型號(hào) E1010L2100
  • 品牌
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 上海市

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更新時(shí)間:2017-12-29 16:02:23瀏覽次數(shù):1034

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產(chǎn)品簡介

HiPuri Beads全血基因組DNA提取磁珠試劑盒適用于從抗凝處理的全血樣品中快速、高效地提取基因組DNA。提取過程采用超順磁性微球,無需離心操作;使用預(yù)制的緩沖液,可直接進(jìn)行提取,無需預(yù)先去除紅細(xì)胞。
本產(chǎn)品既可以手動(dòng)進(jìn)行少量樣品的提取,也適合于用自動(dòng)化工作站進(jìn)行高通量操作。提取的產(chǎn)物可用于酶切,PCR擴(kuò)增、檢測(cè)等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

詳細(xì)介紹

HiPuri Beads全血基因組DNA提取磁珠試劑盒

產(chǎn)品名稱

貨號(hào)

規(guī)格

保存

價(jià)格

HiPuri Beads全血基因組DNA提取磁珠試劑盒

E1010L2100

10 T

4℃

550

HiPuri Beads全血基因組DNA提取磁珠試劑盒E1010L2101100 T4℃

1550

產(chǎn)品介紹

   HiPuri Beads全血基因組DNA提取磁珠試劑盒適用于從抗凝處理的全血樣品中快速、高效地提取基因組DNA。提取過程采用超順磁性微球,無需離心操作;使用預(yù)制的緩沖液,可直接進(jìn)行提取,無需預(yù)先去除紅細(xì)胞。

本產(chǎn)品既可以手動(dòng)進(jìn)行少量樣品的提取,也適合于用自動(dòng)化工作站進(jìn)行高通量操作。提取的產(chǎn)物可用于酶切,PCR擴(kuò)增、檢測(cè)等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱

HiPuri Beads全血基因組DNA提取磁珠試劑盒

HiPuri Beads™ ①

保存于2~8℃,避免冷凍。

Lysis Buffer ②

15~25℃密閉儲(chǔ)存。

Binding Buffer ③

15~25℃密閉儲(chǔ)存。*使用前請(qǐng)加入異丙醇。

Washing Buffer I ④

15~25℃密閉儲(chǔ)存。*使用前請(qǐng)加入無水乙醇。

Washing BufferⅡ ⑤

15~25℃密閉儲(chǔ)存。*使用前請(qǐng)加入無水乙醇。

Elution Buffer ⑥

15~25℃密閉儲(chǔ)存。

Proteinase K Solution ⑦

15~25℃下可保存1年,2~8℃下可*保存。

異丙醇

分析純,需用戶自備。

無水乙醇

分析純,需用戶自備。

磁性分離器

需用戶自備,可從李記生物公司購買。

保質(zhì)期

2年

操作流程

*使用前:

1、在Binding Buffer(③)中加入量(見瓶身標(biāo)簽)的異丙醇(分析純),并于“口”內(nèi)打上“√”,混勻后室溫下密閉保存。

2、在Washing Buffer I (④)中加入量(見瓶身標(biāo)簽)的無水乙醇(分析純),并于“口”內(nèi)打上“√”,混勻后室溫下密閉保存。

3、在Washing BufferⅡ(⑤)中加入量(見瓶身標(biāo)簽)的無水乙醇(分析純),并于“口”內(nèi)打上“√”,混勻后室溫下密閉保存。

準(zhǔn)備工作

1、1.5mL離心管:2個(gè)/樣品

2、單通道移液器:20μL、200μL、1000μL

3、漩渦振蕩器

4、垂直混合儀

5、恒溫水浴鍋/金屬?。?5℃

操作步驟:

1、裂解

取一個(gè)新的1.5mL離心管,加入200μL的抗凝血液樣品(不足200μL時(shí)可用PBS或Elution Buffer(⑥)補(bǔ)足),再分別加入10μL的Proteinase K Solution (⑦)和230μL的Lysis Buffer (②),以渦旋振蕩器zui大轉(zhuǎn)速漩渦震蕩10s后,置于55℃條件下反應(yīng)5min。

2、結(jié)合

加入320μL的在Binding Buffer(③)(檢查是否已加入異丙醇)和20μL的HiPuri Beads(①),以渦旋振蕩器zui大轉(zhuǎn)速漩渦震蕩10min(或漩渦震蕩10s后置于垂直混合儀上反應(yīng)10min)。然后將離心管置于磁性分離器上放置2min,用移液器去上清液并取下離心管。

注:此步驟的磁性分離時(shí)間應(yīng)不少于2min。

3、洗滌

(1)加入600μL Washing Buffer I (④)(檢查是否已加入無水乙醇),漩渦震蕩1min或用移液器緩慢吹打磁珠20次,使磁珠20次,使磁珠充分重懸,再將離心管置于磁性分離器上直至溶液澄清,用移液器去上滑液并取下離心管。重復(fù)該步驟一次。

(2)加入600μL Washing BufferⅡ(⑤)(檢查是否已加入無水乙醇),漩渦震蕩1min或用移液器緩慢吹打磁珠20次,使磁珠充分重懸,再于室溫下靜置1min后,將離心管置于磁性分離器上直至溶液澄清,用移液器移去上清液。

注:步驟(2)應(yīng)盡量除盡洗滌液。

4、干燥

保持離心管于磁性分離器上,于室溫下靜置10min后,取下離心管。

5、洗脫

加入100~200μL Elution Buffer (⑥),用移液器緩慢吹打磁珠50次,使磁珠充分重懸。然后于55℃條件下加熱5min,將離心管置于磁性分離器上直至溶液澄清,轉(zhuǎn)移上清液至新的離心管中,此即為純化得到的基因組DNA,可保存于-20℃。

注意事項(xiàng)

1、操作之前,請(qǐng)務(wù)必認(rèn)真閱讀本產(chǎn)品手冊(cè)。

2、血液樣品的質(zhì)量對(duì)產(chǎn)物DNA的純化量有較大影響,應(yīng)避免反復(fù)凍融血液樣品。

3、應(yīng)避免對(duì)磁珠進(jìn)行冷凍、離心等操作。

4、磁珠取用前應(yīng)充分重懸均勻。

5、磁珠干燥前,應(yīng)使用移液器吸盡洗滌液。

6、應(yīng)避免磁珠過度干燥,否則會(huì)嚴(yán)重降低核酸洗脫效率。

7、建議使用質(zhì)量好的離心管和移液器吸頭,避免因粘附磁珠而造成損失。

8、在96孔板中進(jìn)行磁性分離操作時(shí),磁珠吸附時(shí)間可適當(dāng)延長至4-5min。

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