口蹄疫亞洲Ⅰ型抗體阻斷ELISA檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）

使用說明書

產(chǎn)品名稱

通用名：口蹄疫亞洲Ⅰ型抗體阻斷ELISA檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）

英文名：Test Kit for Antibodies to Foot and Mouth Disease Virus Asia Ⅰ（ELISA）

貨號：E310305

包裝規(guī)格 96T×1/盒(注：酶標(biāo)板不可拆)、96T×2/盒（注：酶標(biāo)板一塊可拆、一塊不可拆）

預(yù)期用途

用于檢測牛、羊、豬血清中口蹄疫亞洲Ⅰ型抗體，可用于口蹄疫亞洲Ⅰ型疫苗免疫效果評價。

原    理

    系由預(yù)包被口蹄疫亞洲Ⅰ型抗體的酶標(biāo)板、抗體工作液、抗原液酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成，應(yīng)用阻斷酶聯(lián)免疫法（ELISA）原理檢測牛、羊、豬血清樣本中口蹄疫亞洲Ⅰ型抗體。實(shí)驗(yàn)時將稀釋的樣本與抗原液同時加入酶標(biāo)板中孵育，樣本中的抗體與酶標(biāo)板上的抗體競爭抗原，阻斷抗原與板的結(jié)合；經(jīng)洗滌后，再加抗體工作液孵育；經(jīng)洗滌后加入酶標(biāo)記物孵育；再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物，在孔中加底物液，與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成負(fù)相關(guān)；加入終止液終止反應(yīng)后，產(chǎn)物變?yōu)辄S色；用酶標(biāo)儀在450nm波長測定各反應(yīng)孔中的吸光值，即可知樣品是否含有口蹄疫亞洲Ⅰ型抗體。

試劑盒組成

儲存及有效期 于2～8℃避光保存，有效期為12個月。

包被板開封后請于2～8℃避光保存，避免受潮。使用期限為2個月。

適用儀器 含450nm、630nm波長的酶標(biāo)儀，37℃恒溫設(shè)備，可調(diào)微量移液器。

樣品準(zhǔn)備

1.取動物全血按常規(guī)方法制備血清，要求血清清亮，無溶血、無污染。樣品1周內(nèi)可于2～8℃保存，*需置-20℃保存。

2.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。

3.用已稀釋的洗滌液將待檢血清按64倍稀釋（如5μl血清加入315μl洗滌液中，混勻）。陰、陽性對照不用稀釋。

參考值 實(shí)驗(yàn)正常的情況下，陰性對照A值≥1.0，陽性對照A值≤50%×陰性對照A值。

檢驗(yàn)結(jié)果的解釋

1.PI（阻斷率）=（1-樣本A值/陰性對照孔平均A值）×*，PI≥50%為陽性；PI＜50%為陰性。

2.本實(shí)驗(yàn)檢測結(jié)果為陽性時表明待檢樣本中含有口蹄疫亞洲Ⅰ型抗體，且效價高于1:128，達(dá)到保護(hù)水平。

3.本實(shí)驗(yàn)檢測結(jié)果為陰性時表明待檢樣本中不含有口蹄疫亞洲Ⅰ型抗體，或效價低于1:128，未達(dá)到充足保護(hù)水平。

4.如需了解樣本抗體的zui終效價，可將樣本進(jìn)行梯度稀釋，使PI≥50%的zui高稀釋比例即為該樣本抗體的zui終效價。

試驗(yàn)方法的局限性

    僅作為定性牛、羊、豬血清中口蹄疫亞洲Ⅰ型抗體，根據(jù)PI值高低可作抗體水平強(qiáng)、中、弱的粗略評估。