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一、熒光顯微鏡的注意要點(diǎn)

（1）嚴(yán)格按照熒光顯微鏡出廠(chǎng)說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行操作，不要隨意改變程序。

（2）應(yīng)在暗室中進(jìn)行檢查。進(jìn)入暗室后，接上電源，點(diǎn)燃超高壓汞燈5～15min，待光源發(fā)出強(qiáng)光穩(wěn)定后，眼睛適應(yīng)暗室，再開(kāi)始觀察標(biāo)本。

（3）防止紫外線(xiàn)對(duì)眼睛的損害，在調(diào)整光源時(shí)應(yīng)戴上防護(hù)眼鏡。

（4）檢查時(shí)間每次以1～2h為宜，超過(guò)90min，壓汞燈發(fā)光強(qiáng)度逐漸下降，熒光減弱；標(biāo)本受紫外線(xiàn)照射3～5min后，熒光也明顯減弱；所以，不得超過(guò)2～3h。

（5）熒光顯微鏡光源壽命有限，標(biāo)本應(yīng)集中檢查，以節(jié)省時(shí)間，保護(hù)光源。天熱時(shí)，應(yīng)加電扇散熱降溫，新?lián)Q燈泡應(yīng)從開(kāi)始就記錄使用時(shí)間。燈熄滅后欲再用時(shí)，須待燈泡充分冷卻后才能點(diǎn)燃。一天中應(yīng)避免數(shù)次點(diǎn)燃光源。

（6）標(biāo)本染色后立即觀察，因時(shí)間久了熒光會(huì)逐漸減弱。若將標(biāo)本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存，可延緩熒光減弱時(shí)間，防止封裱劑蒸發(fā)。長(zhǎng)時(shí)間的激發(fā)光照射標(biāo)本，會(huì)使得熒光衰減和消失現(xiàn)象，故應(yīng)盡可能縮短照射時(shí)間。暫時(shí)不觀察時(shí)可用擋光板遮蓋激發(fā)光。

（7）標(biāo)本觀察時(shí)候應(yīng)采用無(wú)熒光油，應(yīng)避免眼睛直視紫外光源。

（8）電源應(yīng)安裝穩(wěn)壓器，電壓不穩(wěn)會(huì)降低熒光燈的壽命。

二、熒光顯微鏡與光學(xué)顯微鏡的區(qū)別

熒光顯微鏡和普通顯微鏡有以下的區(qū)別：

1.照明方式通常為落射式，即光源通過(guò)物鏡投射于樣品上；

2.光源為紫外光，波長(zhǎng)較短，分辨力高于普通顯微鏡；

3.有兩個(gè)特殊的濾光片，光源前的用以濾除可見(jiàn)光，目鏡和物鏡之間的用于濾除紫外線(xiàn)，用以保護(hù)人目。

熒光顯微鏡也是光學(xué)顯微鏡的一種，主要的區(qū)別是二者的激發(fā)波長(zhǎng)不同。由此決定了熒光顯微鏡與普通光學(xué)顯微鏡結(jié)構(gòu)和使用方法上的不同。

熒光顯微鏡是免疫熒光細(xì)胞化學(xué)的基本工具。它是由光源、濾板系統(tǒng)和光學(xué)系統(tǒng)等主要部件組成。是利用波長(zhǎng)的光激發(fā)標(biāo)本發(fā)射熒光，通過(guò)物鏡和目鏡系統(tǒng)放大以觀察標(biāo)本的熒光圖像。