高效液相色譜又叫高壓、高速、近代液相色譜，通常叫做高效液相色譜。它是60年代中期才建立的一種高效快速分離化合物的方法，到了70年代后期才廣泛用于蛋白質(zhì)的分離純化方面，現(xiàn)已成為分離純化蛋白質(zhì)非常有效的方法之一。
高效液相色譜儀是高效液相色譜的專(zhuān)用儀器，有很多種類(lèi)，從類(lèi)型看分為綜合型高效液相色譜儀和專(zhuān)用型儀器，從功能上分為分析型、制備型、分析和制備兼用型。
具有以下優(yōu)勢(shì)：
1、分辯率高。一根長(zhǎng)10cm的色譜柱可分離十幾種以上的物質(zhì)；
2、靈敏度高。HPLC現(xiàn)已廣泛采用多種高靈敏度的檢測(cè)器，如紫外、熒光、電導(dǎo)等。
3、HPLC分離、純化蛋白質(zhì)的速度快。通常半小時(shí)左右可進(jìn)行一次，大大縮短了純化蛋白質(zhì)的時(shí)間；
4、重復(fù)性好，在作分析蛋白質(zhì)分析試驗(yàn)時(shí)，誤差一般不超過(guò)5%。
5、適應(yīng)面廣，靈活性強(qiáng)，幾乎所有的蛋白質(zhì)根據(jù)它們的性質(zhì)差別（等電點(diǎn)、疏水性、分子量、電荷分布等）都可以用不同HPLC方法進(jìn)行分離提純；
高效液相色譜HPLC使用前期準(zhǔn)備工作：
1、室內(nèi)溫度始終保持恒定，因?yàn)槭覝氐淖兓瘜?duì)高效液相色譜檢測(cè)器有影響。
2、始終保持高效液相色譜儀器包括內(nèi)在系統(tǒng)的清潔。
3、最好提前準(zhǔn)備好備用電源防止停電。
4、所有溶液、試劑、樣品、標(biāo)準(zhǔn)溶液、注射劑等都應(yīng)事先準(zhǔn)備好。
因此，HPLC在蛋白質(zhì)分離純化方面具有重要的位置。
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