技術(shù)文章
質(zhì)粒小量提取試劑盒常見問題與解析
發(fā)布時(shí)間:2017-8-1質(zhì)粒小量提取試劑盒常見從1~4mL菌液可以抽提到5~30µg的質(zhì)粒,純度高,OD260/OD280比值一般為1.8-2.0之間,質(zhì)??芍苯佑糜赑CR、酶切、轉(zhuǎn)化測(cè)序和體外轉(zhuǎn)錄等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。那么在實(shí)驗(yàn)過程中常見問題有哪些,下面跟小編一起來看一下。
質(zhì)粒小量提取試劑盒質(zhì)粒得率低可能原因及解決辦法:
1、菌體未活化,生長(zhǎng)效率低,菌量少。需要活化菌種。
2、屬于低拷貝質(zhì)粒,增加菌液的量。
3、SolutionB裂解不充分,室溫靜置5min。
4、zui后洗脫體積不夠,洗脫液不少于50µL。
質(zhì)粒小量提取試劑盒質(zhì)粒純度差可能原因:
1、SolutionA未加入RNaseA或加入RNaseA的SolutionA 未4℃保存。
2、加入SolutionB劇烈震蕩,使得基因組斷裂。
3、加入BufferN操作慢,形成微小沉淀,蛋白質(zhì)無法被充分漂洗干凈。
4、BufferW2未加入無水乙醇。
5、OD260/OD280比值一般在1.8-2.0之間,小于1.8可能有蛋白污染,大于2.0有部分降解或RNA污染。
制藥網(wǎng)
新邵县|
双牌县|
和田市|
淮滨县|
武威市|
雅安市|
石首市|
四子王旗|
定兴县|
揭阳市|
礼泉县|
浙江省|
从江县|
龙岩市|
琼结县|
垫江县|
凉城县|
嘉善县|
青川县|
蒙山县|
屏山县|
岑溪市|
南昌县|
海门市|
德令哈市|
西宁市|
松潘县|
紫金县|
九龙坡区|
阿勒泰市|
卫辉市|
张家港市|
繁峙县|
壤塘县|
永新县|
乐业县|
三明市|
渭南市|
通州市|
长垣县|
独山县|