PolyPROPYL A 色譜柱
適用于多維蛋白純化(建議順序:離子交換-鹽梯度洗滌分離-HIC)。
蛋白和肽段的疏水相互作用色譜 (HIC) -
HIC分離蛋白的方法是基于蛋白質(zhì)的疏水特點(diǎn),比如RPC。但是,HIC使用完-全含水的緩沖器,保留住了蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)和生物活性。這種分離性通常優(yōu)于RPC方法分離蛋白質(zhì)和多肽,能夠極大的保留蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)和三級(jí)結(jié)構(gòu)。通常情況下,樣品使用硫酸鹽或磷酸鹽等鹽濃度降低梯度洗脫,通過(guò)增加蛋白質(zhì)表面疏水性將其洗脫。表面活性劑(例如丙磺酸;辛基糖苷) 如果必要的話可以被添加到流動(dòng)相的。PolyPROPYL A™ , PolyETHYL A™ 和PolyMETHYL A™ 的相對(duì)疏水值分別是100, 60和15。HIC比其他方法有更大的敏感性,尤其是涉及到非極性基團(tuán)。HIC適用于:
1)多維蛋白純化(建議順序:離子交換-鹽梯度洗滌分離-HIC)。
2)多肽的純化(比如毒液、糖肽類)
3)表面抗體
4)質(zhì)量控制分析蛋白質(zhì)的單一殘基的極性或者突變體的修飾位點(diǎn)。
大于20KDa的蛋白質(zhì)建議使用1000 -或1500-A 的孔。其能力可以與離子交換相媲美。除非該蛋白是公-認(rèn)的顯著疏水性,建議使用PolyPROPYL A™。
