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TSKgel Chelate-5PW色譜柱008645

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品       牌TOSOH

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更新時間:2026-02-04 16:21:11瀏覽次數(shù):255次

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TSKgel Chelate-5PW色譜柱008645
TSKgel Chelate-5PW色譜柱是將亞氨基二乙酸(IDA)基團(tuán)共價鍵合到G5000PW聚合物基質(zhì)上。

TSKgel Chelate-5PW色譜柱是將亞氨基二乙酸(IDA)基團(tuán)共價鍵合到G5000PW聚合物基質(zhì)上。在親和色譜之前將金屬離子例如Zn2+、Ni2+或Cu2+,螯合到IDA基團(tuán)上,金屬離子結(jié)合在IDA基團(tuán)上的三個配位點(diǎn)。因此,目標(biāo)分子可以緊密地結(jié)合在金屬離子的三個游離結(jié)合位點(diǎn)。由于結(jié)合的金屬離子濃度很高(每mL凝膠為20μmol金屬離子),TSKgel Chelate-5PW色譜柱對于目標(biāo)分子有很高的結(jié)合力。

肽和蛋白質(zhì)中的組-氨酸殘基在中性pH條件下通常會吸附到這些螯合離子上。使用含有咪唑或甘-氨酸的緩沖液進(jìn)行蛋白質(zhì)解吸。成功利用這種保留機(jī)制的關(guān)鍵是選擇合適的金屬離子和洗脫緩沖液。Cu2+與蛋白質(zhì)的相互作用更加強(qiáng)烈,Zn2+通常能提高分辨率。使用Zn2+時,色譜柱為飽和載量,而結(jié)合較強(qiáng)的Cu2+的載量大約為總量的一半。蛋白的洗脫通常通過梯度增加咪唑或甘-氨酸濃度,或者梯度降低pH值來進(jìn)行。甘-氨酸(HEPES緩沖液中)是一種強(qiáng)洗脫液,也可以解吸金屬離子,因此有必要在每次分析結(jié)束后對色譜柱進(jìn)行再生。咪唑(磷酸鹽緩沖液中)是一種弱洗脫液,有必要在色譜柱運(yùn)行多次以后再生。


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