醫(yī)藥級(jí)大豆磷脂藥用輔料乳化劑增溶劑藥典標(biāo)準(zhǔn)
 

　　大豆磷脂(供注射用)
 

　　Dadou Linzhi(Gongzhusheyong)
 

　　Soya Lecithin(For Injection)
 

　　[8030-76-0]
 

　　大豆磷脂系從大豆中提取精制而得的磷脂混合物。按無(wú)水物計(jì)算，含氮(N)應(yīng)為1.5%～2.0%，磷(P)不得少于2.7%，磷脂酰膽堿不得少于45.0%，磷脂酰乙醇胺不得過(guò)30.0%，磷脂酰膽堿和磷脂酰乙醇胺總量不得少于70%。
 

　　【性狀】
 

　　本品為黃色至棕色的半固體、塊狀體。
 

　　本品在或乙醇中易溶，在丙酮中不溶。
 

　　酸值　本品的酸值(通則0713)應(yīng)不大于30。
 

　　二甲基亞砜值　本品的二甲基亞砜值(通則0713)應(yīng)不小于75。
 

　　過(guò)氧化值　本品的過(guò)氧化值(通則0713)應(yīng)不大于3.0。
 

　　【鑒別】
 

　　(1)取本品約10mg，加乙醇2ml，加5%氯化鎘乙醇溶液1～2滴，即產(chǎn)生白色沉淀。
 

　　(2)取本品0.4g，加乙醇2ml，加硝酸鉍鉀溶液(取硝酸鉍8g，加硝酸20ml使溶解；另取二甲基亞砜化鉀27.2g，加水50ml使溶解，合并上述兩種溶液，用水稀釋至100ml)1～2滴，即產(chǎn)生磚紅色沉淀。
 

　　(3)在磷脂酰膽堿和磷脂酰乙醇胺含量測(cè)定項(xiàng)下記錄的色譜圖中，供試品溶液主峰的保留時(shí)間應(yīng)與對(duì)照品溶液主峰的保留時(shí)間一致。
 

　　【檢查】
 

　　溶液的顏色　取本品適量，加乙醇制成每1ml中含6mg的溶液，照紫外-可見(jiàn)分光光度法(通則0401)，在350nm處的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，不得過(guò)0.8。
 

　　丙酮不溶物　取本品1.0g，精密稱(chēng)定，加丙酮約15ml，攪拌使其溶解后，用G4垂熔玻璃坩堝濾過(guò)，殘?jiān)帽礈?，洗至丙酮幾乎無(wú)色。殘?jiān)?05℃干燥至恒重，不溶物不得少于90.0%。
 

　　己烷不溶物　取本品10.0g，精密稱(chēng)定，加正己烷100ml，振搖使樣品溶解，用在105℃干燥1小時(shí)的G4垂熔玻璃坩堝濾過(guò)，錐形瓶用正己烷25ml洗滌兩次，洗液過(guò)濾后，G4垂熔玻璃坩堝于105℃干燥1小時(shí)，不溶物不得過(guò)0.3%。
 

　　有關(guān)物質(zhì)　取本品約125mg，精密稱(chēng)定，置25ml量瓶中，加甲醇(2∶1)溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；另取溶血磷脂酰乙醇胺、溶血磷脂酰膽堿與磷脂酰肌醇對(duì)照品各適量，精密稱(chēng)定，加甲醇(2∶1)溶解并定量稀釋制成每1ml中含溶血磷脂酰乙醇胺分別為10μg、20μg、40μg、60μg、80μg、100μg，含溶血磷脂酰膽堿分別為50μg、100μg、200μg、300μg、400μg、500μg的溶液，含磷脂酰肌醇分別為5μg、10μg、15μg、20μg、30μg、40μg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照磷脂酰膽堿和磷脂酰乙醇胺含量測(cè)定項(xiàng)下的色譜條件，精密量取各對(duì)照品溶液20μl注入液相色譜儀，以對(duì)照品溶液濃度的對(duì)數(shù)值為橫坐標(biāo)，峰面積的對(duì)數(shù)值為縱坐標(biāo)計(jì)算回歸方程。精密量取供試品溶液20μl注入液相色譜儀，記錄峰面積，由回歸方程計(jì)算溶血磷脂酰乙醇胺、溶血磷脂酰膽堿、磷脂酰肌醇的含量。含溶血磷脂酰乙醇胺不得過(guò)1%，溶血磷脂酰膽堿不得過(guò)3.5%，溶血磷脂酰乙醇胺和溶血磷脂酰膽堿總量不得過(guò)4.0%，磷脂酰肌醇不得過(guò)5.0%，總有關(guān)物質(zhì)不得過(guò)8.0%。
 

　　殘留溶劑　取本品0.2g，精密稱(chēng)定，置20ml頂空瓶中，加水2ml，密封，作為供試品溶液；另取乙醇、丙酮、、石油醚與正己烷各適量，精密稱(chēng)定，加水溶解并定量稀釋制成每1ml中分別約含200μg、200μg、200μg、50μg、27μg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照殘留溶劑測(cè)定法(通則0861)試驗(yàn)，用聚苯乙烯-二乙烯基苯(或極性相近)為固定液的毛細(xì)管柱(HP-PLOT/Q，30m×0.53mm，40μm)為色譜柱，起始溫度為160℃，維持8分鐘，以每分鐘5℃的速率升溫至190℃，維持6分鐘；氫火焰離子化檢測(cè)器(FID)；進(jìn)樣口溫度為250℃，檢測(cè)器溫度為260℃；頂空瓶平衡溫度為80℃，頂空平衡時(shí)間為45分鐘。各色譜峰之間的分離度應(yīng)符合要求。取供試品溶液與對(duì)照品溶液，分別頂空進(jìn)樣，記錄色譜圖。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，含乙醇、丙酮、均不得過(guò)0.2%，石油醚不得過(guò)0.05%，正己烷不得過(guò)0.02%，總殘留溶劑不得過(guò)0.5%。
 

　　水分 取本品，照水分測(cè)定法(通則0832第一法)測(cè)定，含水分不得過(guò)1.5%。
 

　　蛋白質(zhì) 取本品1.0g，加正己烷10mL微溫使溶解，溶液應(yīng)澄明；如有不溶物，以3000轉(zhuǎn)/分鐘的速度離心5分鐘，棄去上清液，殘留物加正己烷5ml，攪拌使溶解，同法操作2次，殘留物經(jīng)減壓干燥除去正己烷后，加水1ml，振搖使溶解，加縮二脲試液(取硫酸銅1.5g和酒石酸鉀鈉6.0g，加水500ml使溶解，邊攪拌邊加入10%聚乙烯醇溶液300ml，用水稀釋至1000ml，混勻)4ml，放置30分鐘，溶液應(yīng)不呈藍(lán)紫色或紅紫色。
 

　　重金屬　取本品1.0g，依法檢查(通則0821第二法)，含重金屬不得過(guò)百萬(wàn)分之五。
 

　　砷鹽　取本品1.0g置于100ml標(biāo)準(zhǔn)磨口錐形瓶中，加入硫酸5ml，加熱至樣品炭化，滴加濃*溶液，至反應(yīng)停止后繼續(xù)加熱，滴加濃*溶液至溶液無(wú)色，冷卻后加水10ml，蒸發(fā)至濃煙消失，依法檢查(通則0822第二法)，應(yīng)符合規(guī)定(0.0002%)。
 

　　鉛　取本品0.1g，精密稱(chēng)定，置聚四氟乙烯消解罐中，加硝酸5～10ml，混勻，浸泡過(guò)夜，蓋上內(nèi)蓋，旋緊外套，置適宜的微波消解爐內(nèi)，進(jìn)行消解。消解*后，取消解罐置電熱板上緩緩加熱至棕紅色蒸氣揮盡并近干，用0.2%硝酸溶液轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中，并用0.2%硝酸溶液稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；同法制備試劑空白溶液；另取鉛單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用0.2%硝酸溶液定量稀釋制成每1ml中含鉛0～100ng的對(duì)照品溶液。取供試品和對(duì)照品溶液，以石墨爐為原子化器，照原子吸收分光光度法(通則0406第一法)，在283.3nm的波長(zhǎng)處分別測(cè)定，應(yīng)符合規(guī)定(0.0002%)。
 

　　細(xì)菌內(nèi)毒素　取本品，以無(wú)水乙醇充分溶解，進(jìn)一步使用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水稀釋至實(shí)驗(yàn)所需濃度(該溶液中乙醇濃度應(yīng)小于20%)，依法檢查(通則1143)，每1g大豆磷脂中含內(nèi)毒素的量應(yīng)小于2.0EU。
 

　　微生物限度　取本品，依法檢查(通則1105與通則1106)，每1g供試品中需氧菌總數(shù)不得過(guò)102cfu，霉菌和酵母菌總數(shù)不得過(guò)102cfu，不得檢出大腸埃希菌；每10g供試品中不得檢出沙門(mén)菌。
 

　　【含量測(cè)定】
 

　　氮　取本品0.1g，精密稱(chēng)定，照氮測(cè)定法(通則0704第二法)測(cè)定，計(jì)算，即得。
 

　　磷　對(duì)照品溶液的制備　精密稱(chēng)取經(jīng)105℃干燥至恒重的對(duì)照品0.0439g，置50ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取10ml，置50ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻(每1ml相當(dāng)于0.04mg的磷)。
 

　　供試品溶液的制備　取本品約0.15g，精密稱(chēng)定，置凱氏燒瓶中，加硫酸20ml與硝酸50ml，緩緩加熱至溶液呈淡黃色，小心滴加濃*溶液，使溶液褪色，繼續(xù)加熱30分鐘，冷卻后，轉(zhuǎn)移至100ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。
 

　　測(cè)定法　精密量取對(duì)照品溶液與供試品溶液各2ml，分別置50ml量瓶中，各依次加入鉬酸銨硫酸試液4ml，亞*試液2ml與新鮮配制的對(duì)苯二酚溶液(取對(duì)苯二酚0.5g，加水適量使溶解，加硫酸1滴，加水稀釋至100ml)2ml，用水稀釋至刻度，搖勻，暗處放置40分鐘，照紫外-可見(jiàn)分光光度法(通則0401)，在620nm的波長(zhǎng)處分別測(cè)定吸光度，計(jì)算含磷(P)量，即得。
 

　　磷脂酰膽堿和磷脂酰乙醇胺　照效液相色譜法(通則0512)測(cè)定。
 

　　色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)　用硅膠為填充劑(色譜柱Alltima　Sillica，250mm×4.6mm，5μm或效能相當(dāng)?shù)纳V柱)，柱溫為40℃；以甲醇-水-海藻糖-三乙胺(85∶15∶0.45∶0.05)為流動(dòng)相A，以正己烷-海藻糖-流動(dòng)相A(20∶48∶32)為流動(dòng)相B；流速為每分鐘1ml；按下表進(jìn)行梯度洗脫；檢測(cè)器為蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(參考條件：漂移管溫度為72℃；載氣流量為每分鐘2.0L)。
 

　　取磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、溶血磷脂酰乙醇胺、磷脂酰膽堿、溶血磷脂酰膽堿對(duì)照品各適量，用-甲醇(2∶1)溶解并稀釋制成每1ml中含上述對(duì)照品分別為50μg、100μg、100μg、200μg、200μg的混合溶液，取20μl注入液相色譜儀，各成分按上述順序依次洗脫，各成分分離度應(yīng)符合要求，理論板數(shù)按磷脂酰膽堿峰、磷脂酰乙醇胺峰與磷脂酰肌醇峰計(jì)算均不低于1500。
 

　　測(cè)定法　取磷脂酰乙醇胺和大豆磷脂酰膽堿對(duì)照品各適量，精密稱(chēng)定，加-甲醇(2∶1)溶解并定量稀釋制成每1ml中含大豆磷脂酰膽堿分別為50μg、100μg、150μg、200μg、300μg、400μg，含磷脂酰乙醇胺分別為5μg、10μg、15μg、20μg、30μg、40μg的溶液，作為對(duì)照品溶液。精密量取上述對(duì)照品溶液各20μl注入液相色譜儀中，記錄色譜圖，以對(duì)照品溶液濃度的對(duì)數(shù)值與相應(yīng)的峰面積對(duì)數(shù)值計(jì)算回歸方程；另精密稱(chēng)取本品約15mg，置50ml量瓶中，加-甲醇(2∶1)溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。精密量取供試品溶液20μl注入液相色譜儀中，記錄色譜圖。由回歸方程計(jì)算磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺的含量，即得。
 

　　【類(lèi)別】　藥用輔料，乳化劑，增溶劑等。
 

　　【貯藏】　密封、避光，低溫(-18℃以下)保存。