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柱孢藻毒素檢測試劑盒-美國ABRaxis；ELISA 試劑盒用戶操作指南【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失，請仔細閱讀購買說明！齊一生物： ；

柱孢藻毒素檢測試劑盒-美國ABRaxis試劑盒特點 
1.AP單克隆抗體特異地與AP結(jié)合，和其它結(jié)構(gòu)相類似的化學(xué)物質(zhì)不發(fā)生交叉反應(yīng)。單克隆抗體質(zhì)量穩(wěn)定每批次見幾乎沒有變化。
2.檢測范圍5μg/L - 500μg/L (ppb) 。通過固相萃取濃縮可以檢測更低的濃度。
3.這個試劑盒有很高的重復(fù)性，變異系數(shù)在10%之內(nèi)。
4.操作簡單，整個過程僅花費2.5小時
5.試劑盒的形式是96孔微孔板，可以同時檢測多個樣品，花費合理。
檢測原理 （競爭ELISA）
1. 競爭性反應(yīng) 
這個檢測方法依靠單克隆抗體來識別AP。樣品中的AP和一個AP-酶結(jié)合物預(yù)先混合然后加入到每個微孔中競爭包被在微孔表面的特異性抗體。樣品中AP的濃度如果高于AP-酶結(jié)合物，AP將主要與抗體結(jié)合。反之樣品中AP的濃度如果低于于AP-酶結(jié)合物，AP-酶結(jié)合物將主要與抗體結(jié)合。
2. 顯色反應(yīng) 
通過洗滌步驟去除沒有反應(yīng)的AP和過多的AP-酶結(jié)合物。通過加入底物來檢測AP。和微孔板中抗體結(jié)合的AP-酶結(jié)合物催化底物發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生有色物質(zhì)。通過一個孵育期用稀酸終止反應(yīng)。樣品中AP的濃度越高導(dǎo)致結(jié)合到微孔板抗體上的AP-酶結(jié)合物越少，從而產(chǎn)生的顏色越淡，吸光度越低。
3. 定量分析 
利用已知濃度的AP標準的濃度和在450nm條件下獲得的吸光度值做出一條劑量反應(yīng)曲線（標準曲線）。把樣品的吸光度值用內(nèi)插法插入到標準曲線中可以精確的計算出樣品中AP的濃度。
AP 檢測流程
1.樣品處理
在操作前半小時從冰箱中拿出試劑盒使其恢復(fù)到室溫（18-25°C）。過濾樣品，加入甲醇和DMSO使甲醇的zui終濃度為10% (v/v),DMSO的zui終濃度為1%(v/v)。對于一些樣品進行固相萃取是必要的。
2. 標準溶液
利用甲醇溶液（甲醇：水 0.8：8.2）把AP標準濃縮液稀釋10倍。然后對此溶液進一步稀釋成設(shè)定的AP標準的濃度（5μg/L- 500μg/L）。在配制的時候先加甲醇溶液后加標準。
3. 抗原-酶結(jié)合物溶液
重新配制一瓶抗原-酶結(jié)合物溶液：抗原-酶結(jié)合物粉末(#3) + 緩沖液(#4, 白蓋).
4. 標準/樣品 與結(jié)合物混合
在沒有包被的微孔板中(#8)混合100μL AP標準（或樣品）和100μL酶結(jié)合物溶液。先加結(jié)合物后加標準或樣品。
5. 競爭反應(yīng)
在包被抗體的微孔板(#1)的每個孔中加入100μL在第四步中混合的溶液，在室溫(18-25°C)孵育60分鐘。
6. 洗液
用蒸餾水以1：5的比例稀釋洗液（6倍濃縮）：1ml 洗液(#5) + 5ml蒸餾水 
7. 沒有結(jié)合的物質(zhì)
每個微孔用300μL的洗液沖洗，并重復(fù)兩次。在吸水紙上用力的排板出去微孔中的液體。
8. 顯色
每個微孔加入100μL顯色試劑(#6, 棕色瓶)，在室溫(18-25°C)孵育30分鐘。然后加入每孔再100μL的終止液(#7, 黑蓋)終止反應(yīng)。
10. 定量
在450nm測定每個標準的吸光度值制作標準曲線。利用內(nèi)插法把樣品的吸光度值代入標準曲線計算樣品中AP的含量。

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