人粘膜相關(guān)上皮趨化因子分析_MEC ELISA試劑
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訪問次數(shù):2655更新時間:2015-08-19 15:25:55
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磷酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)檢測試劑盒齊一生物長期經(jīng)營ELISA試劑盒,進(jìn)口ELISA試劑盒及抗體(免費代測),分子學(xué)生物試劑盒,金標(biāo)法檢測試劑盒,比色法檢測試劑盒,細(xì)胞菌株,培養(yǎng)基,細(xì)胞因子,生化試劑,耗材等生物試劑產(chǎn)品.誠信經(jīng)營,價格實惠,服務(wù)周到,質(zhì)量保障!提供各種實驗代測服務(wù).歡迎新老客戶來電齊一生物科技(上海)有限公司,專業(yè)生產(chǎn)研發(fā)生化科研試劑:
磷酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)檢測試劑盒操作步驟:
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉.(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1200 ng/L,800 ng/L ,400 ng/L,200ng/L, 100 ng/L).
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔.在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍).加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻.
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘.
4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用.
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干.
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外.
7.溫育:操作同3.
8.洗滌:操作同5.
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色).
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值). 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行.
頭孢磺啶(MUGal肉湯配套試劑) 0.5mg/支×10
亞碲酸鉀(山梨醇麥康凱瓊脂培養(yǎng)基配套試劑) 1.25mg/支×10
新生霉素(改良E.C肉湯配套試劑) 2mg/支×10
四硫磺酸鈉煌綠增菌液配套試劑 2×5支
四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基配套試劑 2×5支
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李氏增菌肉湯LB2配套試劑 2×5支
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亞硫酸鹽-多粘菌素-磺胺嘧啶瓊脂配套試劑 5*2支/盒
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改良山梨醇麥康凱瓊脂或改良麥康凱肉湯配套試劑 10支
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