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訪問(wèn)次數(shù):7319更新時(shí)間:2015-07-03 15:28:28
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齊一生物巨噬細(xì)胞趨化因子(MCF)檢測(cè)試劑盒齊一生物的ELISA試劑盒是您的*選擇:每個(gè)試劑盒都經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)檢控制,包括:板內(nèi)、板間實(shí)驗(yàn)精度,靈敏度,回收率,穩(wěn)定性等指標(biāo)的測(cè)定。我們提供的96孔板已經(jīng)預(yù)包被好捕獲抗體,三步法檢測(cè)體系簡(jiǎn)單而直接,可根據(jù)450 nm波長(zhǎng)的讀值迅速計(jì)算定量結(jié)果。試劑盒中提供的檢測(cè)抗體能夠識(shí)別全長(zhǎng)靶蛋白的抗原決定簇以及它們的三維結(jié)構(gòu),使您的檢測(cè)結(jié)果更穩(wěn)定可靠
齊一生物巨噬細(xì)胞趨化因子(MCF)檢測(cè)試劑盒簡(jiǎn)介:
ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISAKit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見(jiàn)的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒等ELISA試劑盒自從60-70年代問(wèn)世以來(lái),得到*科研工作者的認(rèn)可及推崇,在歐美及中國(guó)獲得很大的推廣,尤其是國(guó)內(nèi)生化領(lǐng)域的長(zhǎng)足發(fā)展.Elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法.由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中.ELISA檢測(cè)試劑盒適用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類(lèi)戊型肝炎(HEV)病毒IgM抗體ELISA檢測(cè).ELISA試劑盒操作步驟
ELISA試劑盒使用前,將所有試劑充分混勻.不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差.
根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù).每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔.每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔.標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi).
加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi).立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體.蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí).
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干.重復(fù)此操作3次.如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次.
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘.
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干.重復(fù)此操作3次.如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次.
每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘.避免光照.
取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果.
在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值.
ELISA操作步驟
酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)材料,試劑,溶液
1.酶標(biāo)板,100μltip頭,1mlEp管,濕盒
2.包被稀釋液(0.05mol/L碳酸鈉-碳酸氫鈉buffer,pH9.6)
碳酸鈉0.15g,碳酸氫鈉0.29g,疊氮鈉0.02g,加雙蒸水100ml,調(diào)pH9.6
3.封閉液(5%小牛血清/PBS溶液)
小牛血清5ml,1*PBS(pH7.4)95ml
4.洗滌液(PBST,pH7.4)
NaCl0.8g,KH2PO40.02g,Na2HPO4.12H2O0.29g,KCl0.02g,Tween200.05ml,疊氮鈉0.01g,加雙蒸水100ml,調(diào)pH7.4
5.樣本稀釋液(PBS,pH7.4)
NaCl0.8g,KH2PO40.02g,Na2HPO4.12H2O0.29g,KCl0.02g,疊氮鈉0.01g,加雙蒸水100ml,調(diào)pH7.4
6.酶標(biāo)第2抗體(羊抗兔)稀釋范圍1:5,000-1:100,000
7.底物液(TMB-*尿素溶液)
①底物液A:TMB20mg,無(wú)水乙醇10ml,加雙蒸水100ml.
②底物液B(0.1mol/L檸檬酸-0.2mol/L磷酸二氫鈉緩沖液,pH5.0-5.4)
Na2HPO41.46g,檸檬酸0.933g,0.75%*尿素0.64ml,加三蒸水100ml,調(diào)pH5.0-5.4
③底物A和B按1:1混合即成TMB-*尿素溶液.
8.終止液(2mol/LH2SO4溶液)雙蒸水200ml,濃硫酸34ml,(緩慢滴加并不斷攪拌),加雙蒸水300ml
9.0.9%生理鹽水




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