在無菌藥品的生產(chǎn)與質(zhì)量控制體系中，包裝系統(tǒng)的完整性是確保藥品在有效期內(nèi)免受微生物污染、維持其安全性與有效性的生命線。任何微小的泄漏都可能導(dǎo)致災(zāi)難性的后果。因此，密封性檢查（也稱為容器密閉完整性測試，CCIT）已成為國內(nèi)外藥品法規(guī)和藥典的核心要求。

為科學(xué)指導(dǎo)和規(guī)范此項關(guān)鍵檢測，國家藥典委員會發(fā)布了 《9650/9628 無菌藥品包裝系統(tǒng)密封性指導(dǎo)原則》（2024年公示稿，2025年正式實(shí)施）。該指導(dǎo)原則系統(tǒng)闡述了一系列確定性檢漏方法，其中 液下氣泡試驗法 作為一種經(jīng)典、直觀且成本效益高的定性方法，因其能夠直接可視化泄漏位置，在藥包材研發(fā)、生產(chǎn)過程控制和產(chǎn)品放行等環(huán)節(jié)具有不可替代的價值。

液下氣泡試驗法的核心原理與兩種經(jīng)典方法

液下氣泡試驗法的基本原理是利用壓力差：當(dāng)包裝內(nèi)外存在壓差時，氣體將通過包裝上的泄漏通道逸出或進(jìn)入，在浸入的檢測液體中形成連續(xù)的氣泡流，從而指示泄漏的存在。根據(jù)壓力差產(chǎn)生的方式，該方法主要分為兩種：

抽真空法（外部負(fù)壓法）
此方法適用于絕大多數(shù)含有頂空氣體的剛性或柔性包裝，如西林瓶、安瓿瓶、塑料瓶、軟袋等。

• 原理：將樣品浸入裝有檢測液（常用為水）的透明真空腔內(nèi)。通過設(shè)備抽真空，在包裝外部形成穩(wěn)定的負(fù)壓環(huán)境。若包裝存在泄漏，其內(nèi)部壓力高于外部，內(nèi)部氣體將通過漏點(diǎn)向外逸出，在液體中形成連續(xù)的氣泡序列。

• 關(guān)鍵參數(shù)：真空度的設(shè)定至關(guān)重要。它需要在檢測靈敏度與包裝抗變形能力之間取得平衡。過高的真空度可能導(dǎo)致無缺陷的柔性包裝過度變形甚至破裂，而過低的真空度則可能無法檢出微小泄漏。指導(dǎo)原則建議，通過驗證確定合適的真空度與保壓時間。

內(nèi)部加壓法（內(nèi)部正壓法）
此方法主要適用于具有一定柔韌性、能夠承受一定內(nèi)部正壓的無孔柔性包裝，如某些輸液軟袋、塑料共擠膜袋等。

• 原理：通過向包裝內(nèi)部注入并保持一定壓力的潔凈氣體（如空氣或氮?dú)猓蛊鋬?nèi)部壓力高于外部大氣壓。隨后將包裝浸入檢測液中，若有泄漏，內(nèi)部氣體將從漏點(diǎn)溢出，形成可見氣泡。

• 關(guān)鍵參數(shù)：核心是試驗壓力的設(shè)定。壓力必須足以驅(qū)動氣體通過可能的漏點(diǎn)，但又不能導(dǎo)致包裝接縫過度膨脹或破裂。通常需要使用專用的夾具或限位裝置來約束包裝的非預(yù)期形變，確保觀察的有效性。

方法的驗證與實(shí)施：確保檢測結(jié)果可靠

為確保液下氣泡試驗法檢測結(jié)果的科學(xué)、可靠與可比性，必須按照 《9650/9628 無菌藥品包裝系統(tǒng)密封性指導(dǎo)原則》 的要求進(jìn)行嚴(yán)格的方法驗證。這與藥品包裝材料相容性研究中分析方法驗證的嚴(yán)謹(jǐn)思路一脈相承。驗證的核心項目包括：

• 系統(tǒng)適用性：每次測試前或批次測試中，必須使用陽性對照品和陰性對照品進(jìn)行驗證。陽性對照品（如帶有已知微孔的樣品）必須能產(chǎn)生連續(xù)氣泡，陰性對照品（完好樣品）必須無氣泡產(chǎn)生，以此確認(rèn)整個檢測系統(tǒng)處于正常、靈敏的工作狀態(tài)。

• 檢測限：方法應(yīng)能可靠檢出目標(biāo)限度的泄漏。檢測限通常表示為方法檢出率≥95%的泄漏孔徑。這需要通過制備一系列不同已知孔徑的陽性樣品進(jìn)行驗證。

• 專屬性/可靠性：證明方法能夠明確區(qū)分泄漏樣品與無泄漏樣品，不受包裝形狀、檢測液等因素的干擾。

• 結(jié)果判定：判定標(biāo)準(zhǔn)必須清晰。通常，連續(xù)不斷的氣泡流被視為包裝存在泄漏的明確證據(jù)。而偶爾出現(xiàn)的、孤立的、不連續(xù)的氣泡，可能源于材料表面吸附氣體的釋放，不應(yīng)直接判為泄漏。

實(shí)施要點(diǎn)與儀器考量

成功實(shí)施液下氣泡試驗法，離不開規(guī)范的流程與可靠的設(shè)備支撐。

1. 樣品準(zhǔn)備：確保包裝樣品清潔干燥，特別是封口區(qū)域無液體或污染物，以免影響觀察或造成假陽性。

2. 檢測液：通常使用去離子水或含有潤濕劑的水，以降低表面張力，使氣泡更容易形成和觀察。液體應(yīng)透明潔凈。

3. 浸沒深度與觀察：樣品泄漏部位應(yīng)浸入液面以下足夠深度（通常建議≥2.5cm），并有良好的照明。觀察者應(yīng)從多個角度仔細(xì)觀察至少15-30秒。

4. 儀器設(shè)備的選擇：選擇專業(yè)的測試儀是獲得穩(wěn)定、可靠結(jié)果的基礎(chǔ)。一臺符合藥典指導(dǎo)原則要求的設(shè)備應(yīng)具備：

• 高精度壓力控制：能夠?qū)φ婵斩然蛘龎哼M(jìn)行精確設(shè)定、穩(wěn)定維持和數(shù)字顯示，這是保證測試條件一致性和結(jié)果重現(xiàn)性的核心。

• 優(yōu)良的觀察窗：透明的測試腔體或水槽，提供無變形、清晰的觀察視野。

• 標(biāo)準(zhǔn)化的配件：提供適用于不同規(guī)格包裝的標(biāo)準(zhǔn)化樣品夾具、密封接頭和限位裝置，確保測試的規(guī)范性與安全性。

• 數(shù)據(jù)記錄功能：能夠記錄測試壓力、時間等關(guān)鍵參數(shù)，便于質(zhì)量追溯。

在制藥行業(yè)競爭日益激烈的背景下，專業(yè)的質(zhì)量控制不僅是法規(guī)要求，也是企業(yè)構(gòu)建市場信任的核心壁壘。深入理解并規(guī)范執(zhí)行如液下氣泡試驗法這樣的關(guān)鍵檢測，正是企業(yè)保障藥品安全、展現(xiàn)專業(yè)實(shí)力的具體體現(xiàn)。

常見問題解答 (Q&A)

Q1：液下氣泡試驗法可以檢出多小的泄漏？

A1：該方法的檢測限并非固定值，它取決于泄漏通道的形狀（孔道或狹縫）、包裝內(nèi)外壓差、檢測液性質(zhì)等多種因素。通過方法驗證，可以確定該方法在特定條件下能穩(wěn)定檢出的最小泄漏孔徑。對于極微小的泄漏（如分子級），則需要靈敏度更高的方法，如高壓放電法或真空衰減法。

Q2：為什么測試時要求觀察“連續(xù)氣泡"？單個氣泡算泄漏嗎？

A2：這是區(qū)分真實(shí)泄漏與干擾信號的關(guān)鍵。連續(xù)不斷的氣泡流表明氣體正在通過一個固定的通道持續(xù)逸出，是泄漏的確鑿證據(jù)。而單個或零星的氣泡，很可能來自材料表面凹坑中截留的氣體釋放，或溶解在檢測液中的氣體析出，不能作為判定泄漏的依據(jù)。嚴(yán)格的觀察標(biāo)準(zhǔn)是保證方法專屬性的重要一環(huán)。

Q3：對于非常柔軟的塑料袋，采用內(nèi)部加壓法測試時需要注意什么？

A3：柔性包裝在正壓下會膨脹，可能掩蓋泄漏點(diǎn)或改變泄漏通道的狀態(tài)。因此，測試時必須使用專用的限位夾具或夾板，在不影響疑似泄漏區(qū)域的前提下，限制包裝的總體膨脹。同時，加壓過程應(yīng)平穩(wěn)緩慢，避免壓力沖擊對包裝造成額外應(yīng)力。

Q4：實(shí)驗室在建立液下氣泡試驗法時，最重要的步驟是什么？

A4：方法驗證是重中之重。在將該方法用于產(chǎn)品放行前，必須使用經(jīng)過計量的標(biāo)準(zhǔn)漏孔或自制陽性對照品，完成對檢測限、專屬性、重復(fù)性等指標(biāo)的完整驗證。這不僅是《9650/9628 無菌藥品包裝系統(tǒng)密封性指導(dǎo)原則》 的明確要求，也是確保檢測數(shù)據(jù)科學(xué)、合規(guī)，并能經(jīng)受住審計與挑戰(zhàn)的途徑。

免責(zé)聲明：本文內(nèi)容基于《中國藥典》2025年版相關(guān)指導(dǎo)原則等公開標(biāo)準(zhǔn)文件進(jìn)行技術(shù)解讀，旨在提供信息參考與行業(yè)知識分享。文中所述測試方法細(xì)節(jié)與要求，應(yīng)以國家藥典委員會正式頒布的標(biāo)準(zhǔn)文本為準(zhǔn)。儀器選擇與應(yīng)用需結(jié)合具體產(chǎn)品與工藝需求。如有任何疑問或發(fā)現(xiàn)錯誤，歡迎與我們溝通指正。