微生物挑戰(zhàn)法，又稱微生物入侵法，屬于較為常見的一種密封完整性測試方法，通常與模擬灌裝同時進行。試驗通過模擬灌裝驗證方案進行培育基模擬灌裝，然后進行壓塞軋蓋后，目檢是否合格，已經(jīng)驗證的滅菌柜滅菌后，把容器密封面浸入到菌液中，使樣品容器內(nèi)的培育基完quan接觸封口內(nèi)表面，樣品的封口和頸部的外表面應浸泡在菌懸液中，浸泡肯定時間后取出，定期培育后檢查是否有微生物侵入，以確定容器密封系統(tǒng)的完整性。同時，需要做陽性對比試驗，確認培育基的促生長力量。

檢測設備：

                                                                 LT-PNP微生物入侵試驗儀

試驗方法：

1、把50個經(jīng)滅菌的試樣，分開編號，充分侵入菌懸液中，同時將試樣平放，使袋內(nèi)的無菌培育基充分接觸焊接部位的內(nèi)表面，試樣容器在菌懸液中持續(xù)浸泡4小時。

2、浸泡結束時再取一份菌懸液，用平板計數(shù)菌懸液的濃度。

3、從菌懸液中取出試樣，擦干試樣容器外殘余的菌懸液，然后用含0.5%過乙酸的70%異丙醇消毒容器外表面。

4、取裝滿培育基樣品兩個，作陽性對比，其外表用含0.5%過乙酸的70%異丙醇消毒，接種入10~～100CFU銅綠假單胞菌。

推斷標準：

1、步驟2、步驟4、5中進行的養(yǎng)分性試驗都合格，試樣的挑戰(zhàn)試驗方可有效。

2、在挑戰(zhàn)試驗開頭時，挑戰(zhàn)用菌懸液濃度（活菌數(shù)）必需達到1×106CFU/ml。

3、挑戰(zhàn)試驗中如長菌，需記錄長菌的試樣數(shù)，并按下述要求作進一步調(diào)查。

4、仔細檢查容器各部位封口處是否有缺損，以免造成微生物浸入。

5、把看到的試樣容器封口的缺陷，拍照并且具體記錄。