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南通飛宇生物科技有限公司

主營產(chǎn)品: 植物單體提取物,標準品,ELISA試劑盒,生物試劑,細胞生物學產(chǎn)品

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T4 RNA連接酶,T4 DNA連接酶

T4 RNA連接酶,T4 DNA連接酶
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更新時間:2018-05-14 09:00:00瀏覽次數(shù):4231

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【簡單介紹】
南通飛宇生物科技有限公司您的T4 RNA連接酶,T4 DNA連接酶試劑采購專家
【詳細說明】

T4 RNA連接酶
英文名稱:T4 RNA Ligase 
分子量:43.6kDa,單體
級別:BR
來源:含有T4噬菌體克隆基因63的大腸桿菌
濃度:10u/ul 
活性定義:是指在37℃、30分鐘內(nèi)將1nmol 5'-[32P]-(A)12-18轉化為磷酸酶抗性形式所需的酶量
酶活性分析混合物:50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 10uM 5'-[32P]-(A)12-18(10uM 5'-末端)
保存液組分:20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT,0.1mM EDTA,0.5mM ELUGENT變性劑和50%(v/v)甘油
10×反應緩沖液:500mM HEPES-NaOH(PH8.0,25℃), 100mM MgCL2, 100mM DTT
抑制劑:金屬螯合劑、SH基團修飾試劑
失活:70℃加熱10分鐘
質(zhì)量控制:測試表明無內(nèi)切和外切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染
備注:反應體系中ATP的濃度取決于連接反應的類型,*的BSA反應濃度是0.1mg/ml
性狀:重組酶,催化ATP依賴的分子內(nèi)和分子間磷酸二酯鍵連接(5'-磷酸基團和3'-羥基末端),底物分子為多聚核苷酸、寡核苷酸、ssRNA和ssDNA,分子之間的zui小的連接底物是核苷3',5'-二磷酸,而分子內(nèi)連接的zui小底物是8個堿基的寡核苷酸。配套提供反應緩沖液、ATP和BSA溶液。催化3'→5'磷酸二酯鍵的形成,使核苷酸的5'-磷酸末端和5'-羥基末端連接。作用底物包括單鏈RNA、DNA及二核苷焦磷酸。隨酶提供10X 反應緩沖液
用途:生化研究。連接RNA和RNA ;RNA3'-末端標記胞嘧啶3',5'-雙[a-32P]磷酸; tRNA的特異性修飾;合成寡核苷酸的環(huán)化;寡聚脫氧核糖核苷酸與單鏈cDNA連接,用于5'RACE(快速擴增cDNA末端)分析
保存: -20°C

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T4 DNA連接酶
英文名稱:T4 DNA Ligase 
CAS號:9015-85-4
分子量:55.3kDa,單體
來源:含有T4噬菌體克隆基因30的大腸桿菌
濃度:30u/ul(200CEU/ul)
活性定義:是指在ATP-PPi交換反應中,37℃、30分鐘內(nèi)將1nmol [32PPi]轉換為Norit可吸收形式所需的酶量(weiss單位,1個weiss單位相當于約200個粘性末端連接單位。1個粘性末端連接單位:20ul反應體系(50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端)中,在16℃、30分鐘內(nèi)連接50%連接HindIII酶切的Lambda DNA 產(chǎn)物所需的酶量) 

酶活性分析混合物:66mM Tris-HCL(PH7.6), 10mM DTT, 6.6mM MgCL2, 0.066mM ATP, 3.3uM[32PPi]
保存液組分:20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT,0.1mM EDTA和50%(v/v)甘油
10×T4 DNA Ligase緩沖液(#B69):400mM Tris-HCL, 100mM MgCL2, 100mM DTT, 5mM ATP(PH7.5,25℃)
50% PEG溶液:50%(w/v)聚乙二醇4000
抑制劑:當反應體系中NaC1或KC1的濃度超過200 mM時,可強烈抑制T4 DNA Ligase活性
失活:65℃加熱10分鐘或70℃加熱5分鐘
注意:聚乙二醇(PEG)可*地增加平末端DNA的連接效率,PEG4000在反應體系中的*濃度為5%(w/v);T4 DNA Ligase與DNA結合會改變條帶的瓊脂糖凝膠電泳遷移率,為避免此現(xiàn)象,電泳前需處理樣本或分子量標準。樣本處理如下:樣本與Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液(#R1151)混合,75℃加熱5分鐘或65℃加熱10分鐘后冰浴保存;轉化時,連接產(chǎn)物的體積不得超過感受態(tài)細胞體積中的10%;電轉化之前,先用氯仿抽提方法除去連接混合物中的T4 DNA Ligase,然后經(jīng)乙醇沉淀純化抽提產(chǎn)物
質(zhì)量控制:測試表明無內(nèi)切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能檢測:粘性末端或平末端DNA的連接能力
性狀:液體。該酶催化雙鏈DNA或RNA中毗鄰的5'磷酸基團和3'-羥基末端之間形成磷酸二酯鍵,還可以修復雙鏈DNA、RNA或DNA/RNA復合體中的單鏈切口,連接DNA的粘性和平末端,但該酶對單鏈核酸無酶活性。該酶需要輔因子ATP
用途:科研、實驗。粘性末端或平末端雙鏈DNA的連接;雙鏈寡核苷酸接頭與雙鏈DNA連接;雙鏈DNA、RNA或DNA-RNA復合體中缺口的修復;連接酶介導的RNA檢測;位點特異性突變;擴增片段長度多態(tài)性
貯存條件: -20°C貯存

FY2007    雷公藤次堿    CAS號:11088-09-8
FY2008    雷公藤春堿    CAS號:37239-48-8 
FY2009    雷公藤新堿    CAS號:41758-69-4
FY1401    硫辛酸    Alphalipoic acid
FY1402    連翹苷    Forsythin
FY1403    連翹酯苷A,連翹脂素    Forsythoside A
FY1404    連翹酯苷B    Forsythoside B
FY1405    L-脯氨酸    L-Proline
FY1406    L-甘氨酸    L-Glycine
FY1407    L-谷氨酸    L-Glutamic acid
FY1408    L-谷氨酰胺    L-Glutamine
FY1409    L-瓜氨酸    L-Citrulline
FY1410    L-胱氨酸    L-Cystine
FY1881    L-蘇氨酸    L-Threonine
FY1882    L-賴氨酸    L-Lysine
FY1883    L-賴氨酸鹽酸鹽    L-Lysine monohydrocholoride
FY1942    L-丙氨酸    L-Alanine
FY1943    β-丙氨酸    β-Alanine
FY1945    L-蛋氨酸(甲硫氨酸)    L-Methionin
FY1944    L-苯丙氨酸    L-Phenylalanine
FY1946    L-絲氨酸    L-Serine
FY1947    L-亮氨酸(白氨酸)    L-Leucine



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