中文名稱:人原鈣黏素1（PCDH1）ELISA試劑盒
包裝規(guī)格:48T/96T
適應范圍:僅適用于科研實驗
科研范疇:elisa試劑盒系列
公司供應的科研產品種類繁多,elisa試劑盒/標準品/研抗體/細胞/生物培養(yǎng)基/生化試劑等,產品品質高,*.選擇本公司產品一定能夠助您實驗成功!
人原鈣黏素1（PCDH1）ELISA試劑盒 在實驗中的幾個重要的操作步驟:
一、加樣
1.1 樣品稀釋液少加，或血清多加，都會引起本底增高。對于間接法來說，受上述兩個因素影響更大。因為血清中受檢的特異性IgG 只占總IgG 中的一小部分。IgG 的吸附性很強，非特異IgG 可直接吸附到固相載體上，有時也可吸附到包被抗原的表面。這些非特異的IgG均可以和酶標二抗發(fā)生反應而造成較高陰性本底或假陽性。如果加入的血清過多，高于規(guī)定的稀釋倍數，必將帶來陰性高值。
1.2 酶結合物的不正確加入。一般來講，酶也有一定的非特異吸附，將包被好的酶聯板再封閉，一方面也可避免酶的非特異性吸附。通常每孔加入的封閉液為120μl。如果加入的酶多于120μl 或加在較高的孔壁上或孔口，也會引起本底升高或假陽性。
二、溫育
2.1 由于試劑盒確定的一定溫度下的反應時間并不是反應的終點，升高反應的溫度，會加快反應，同樣增加時間會延長反應，這樣得到的反應程度會比試劑盒確定的反應程度多，也會引起陰性高值或假陽性。
2.2 由于試劑盒通常設定的反應溫度為37 度，在這個溫度下放置30 分鐘，蒸發(fā)的水分會很多，對于整個反應體系來講，各種反應物的濃度會不斷增加，這樣必會導致反應zui后的值升高。因此溫育時應蓋上膠貼。
2.3 試劑盒在設計時，反應是在靜置條件下完成的，如果反應改變?yōu)檎駝訔l件，會加快分子的熱運動，增加反應的機會。
2.4 試劑盒的溫育過程是在培養(yǎng)箱中進行，這和水浴的條件不一樣。水浴可是酶聯板迅速升溫，但較難將溫度控制在較穩(wěn)定的溫度，往往高于37 度，同樣會引起高值陰性。
三、洗板
3.1 各個廠家使用的洗液配方是不同的，是根據各自試劑的條件配制的，采用不配套的洗液常會得到不正常的反應結果，包括本底過高。本公司的洗液采用*的洗滌系統(tǒng)不能和其它公司的試劑盒混用。
3.2 試劑盒中提供的洗液是濃縮的，應該稀釋到規(guī)定的倍數使用，過多稀釋洗液，會影響洗液的效果，而使反應的本底過高。
3.3 稀釋洗液的水應該是新鮮的蒸餾水，電導率小于1.2μs。如果水中含有過多的Ca2+、Mg2+，這些離子會占用表面活性劑，影響洗滌效果。
3.4 洗板時，應每孔加滿洗液，如果加入的洗液液量不夠，對洗滌的效果影響也是很大的。本公司的酶聯板板孔為400μl，比別的廠家的板孔大，因此洗了別公司的板后要及時調整液量，以避免加液量不滿。
3.5 洗板的次數不夠孔內多余的抗原（抗體）或酶結合物不能*去除，也會因此本底升高。
3.6 洗板的強度和洗板的浸泡時間是密切相關的。洗板機不同，使用的泵不同，液體加入時的沖力不同。如果加入洗液的沖力不大，也沒有設定浸泡時間，同樣會使結果的A 值偏高。
3.7 洗板完畢后，要進行拍板，盡量采用質量好的毛巾和吸水紙，使用易掉渣的紙，紙屑會留在板孔中，由于紙屑中含有氧化劑而造成高值陰性。
四、顯色
4.1加A、B 液準確，順序不能顛倒，要及時終止顯色。終止后要在3 分鐘內讀數，否則強陽性會變低。
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