超聲波法提取柿葉總黃酮。工藝流程：柿葉y粉碎y乙醇浸泡y超聲處理y離心y定容y測定。單因素實驗。1乙醇濃度對超聲波提取效果的影響。準(zhǔn)確稱取柿葉粗粉2.0g，共6份，按料液比1B25，分別加入40%、50%、60%、70%、80%、90%的乙醇，浸泡1h，超聲提取30min，提取液離心（4000r/min）10min，用少量70%乙醇洗滌藥渣后，離心5min.合并離心液置100ml容量瓶，加乙醇溶液定容，取0.5ml提取液按/1.2.20方法進(jìn)行顯色反應(yīng)，在510nm處測定吸光值。o料液比對超聲波提取效果的影響。準(zhǔn)確稱取柿葉粗粉2.000g，共4份，按料液比1B10，1B15，1B20，1B25分別加入70%乙醇，以下操作同1.？提取時間對超聲波提取效果的影響。準(zhǔn)確稱取柿葉粗粉2.000g，共4份，料液比1B25，浸泡1h后按選擇的提取時間15、30、45、60min進(jìn)行超聲提取，以下操作同1.正交實驗。根據(jù)以上單因素實驗結(jié)果，選擇對實驗影響較大的3個因素各設(shè)置3水平，采用L9（33）正交實驗，以確定柿葉總黃酮物質(zhì)的*提取條件。常規(guī)回流法提取柿葉總黃酮測定吸光值為0.092，經(jīng)計算得總黃酮得率為2.00%。
　　
　　超聲波提取法單因素實驗結(jié)果：乙醇濃度對超聲波提取的影響。表明，隨乙醇濃度的增大，柿葉總黃酮的提取率也隨之增高；當(dāng)乙醇濃度超過60%時，隨乙醇濃度的增高，柿葉總黃酮的提取率反而下降。這可能是由于隨乙醇濃度的增大，提取液中除黃酮外的其他物質(zhì)的提取率也隨之提高，從而影響黃酮類物質(zhì)的提取，造成柿葉總黃酮的提取率下降。料液比對超聲波提取的影響。由可知，柿葉總黃酮提取率隨料液比的增大而迅速增大；當(dāng)料液比達(dá)到1B20時，總黃酮提取率的增加幅度明顯減緩。
　　
　　提取時間對超聲波法提取的影響。由可知，總黃酮提取率隨超聲時間的增加而呈上升趨勢，但增加的趨勢不很明顯，特別是當(dāng)提取時間達(dá)到45min以上時，提取率基本無變化。料液比對超聲波提取的影響提取時間對超聲波提取的影響2.3正交實驗結(jié)果正交實驗表明（，2），影響柿葉黃酮類化合物提取率因素的順序為：B（料液比）>C（提取時間）>A（乙醇濃度），即料液比是影響柿葉總黃酮提取率的zui重要因素。從平均提取得率K值來看，以提取條件A3B3C3為*提取工藝，即乙醇濃度60%，超聲45min，料液比1：25。
　　
　　正交實驗結(jié)果實驗號乙醇濃度A料液比B提取時間C空白總黃酮得率M%11.4432121.6363133.042421232.13752321.77162312.156731322.81183232.3869312.464K12.0402.1302.021-K22.0211.9252.0472.073-K32.5412.5542.5412.516-R0.5200.5290.5200.495-2.4驗證實驗稱取柿葉干粉2.000g，以料液比1B25加入60%的乙醇，浸泡1h，進(jìn)行超聲波提取45min，提取液離心（4000r/min）10min，用少量70%乙醇洗滌藥渣后，再次離心15min.合并離心液置100ml容量瓶，加乙醇溶液定容。取0.5ml提取液按/1.2.20項進(jìn)行顯色反應(yīng)，在510nm處測吸光值OD=0.172，柿葉總黃酮得率為3.54%，與正交實驗分析結(jié)果相符。
　　
　　超聲波提取法與常規(guī)回流法比較由可知，超聲波法柿葉總黃酮的提取得率提高77%，縮短提取時間195min，料液比（提取溶劑用量）降低一半。
　　
　　超聲波提取法與常規(guī)回流提取法情況對比提取方法時間Mmin料液比提取率M%常規(guī)回流法2401B552.00超聲波提取法451B25超聲波提取柿葉黃酮的*工藝條件是A3B3C3，即乙醇濃度60%，超聲時間45min，料液比1B25.與常規(guī)回流法相比，超聲波提取法可提高柿葉總黃酮得率77%，并且可大幅度縮短提取時間，降低提取溶劑的用量。因此，超聲波提取法具有提取效率高、成本低的明顯優(yōu)勢。