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測(cè)定意義

高密度脂蛋白為血清蛋白之一，主要由肝臟合成，運(yùn)載周圍組織中的膽固，再轉(zhuǎn)化為膽汁酸或直接通過膽汁從腸道排出，是一種抗動(dòng)脈粥樣硬化的血漿脂蛋白，是冠心病的保護(hù)因子，俗稱“血管清道夫"，對(duì)冠心病的臨床診斷是一個(gè)重要的參考指標(biāo)。

測(cè)定原理

用沉淀劑分離血清中的高密度脂蛋白膽固，利用酯酶催化膽固酯水解生成游離膽固和游離脂肪酸，從而把膽固酯轉(zhuǎn)化為FC；進(jìn)一步利用膽固氧化酶催化FC氧化，生成△4-膽甾烯酮和H2O2；再利用過氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比和酚，生成紅色醌類化合物；在500nm有特征吸收峰。

需自備的儀器和用品

離心機(jī)，恒溫水浴鍋、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。

試劑組成和配制

試劑一：液體20mL×1瓶，4℃保存。

試劑二：液體15mL×1瓶，4℃保存。

試劑三：粉劑×1瓶，-20℃保存。臨用前加5mL試劑四充分溶解。

試劑四：液體10mL×1瓶，4℃保存。

標(biāo)準(zhǔn)品：液體1mL×1支，4℃保存。

樣品處理

取血后3小時(shí)內(nèi)分離血清，將血清樣品與試劑一按照1:1的比例充分混勻，25℃靜置15min，2000g離心15min，上清置于冰上待測(cè)。

測(cè)定操作表

計(jì)算公式

1. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

HDL-C含量（mmol/L）= A測(cè)定管÷A標(biāo)準(zhǔn)管×C標(biāo)準(zhǔn)管

                     =5×A測(cè)定管÷A標(biāo)準(zhǔn)管

C標(biāo)準(zhǔn)管：5mmol/L

b．用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

HDL-C含量（mmol/L）= A測(cè)定管÷A標(biāo)準(zhǔn)管×C標(biāo)準(zhǔn)管

                     =5×A測(cè)定管÷A標(biāo)準(zhǔn)管

C標(biāo)準(zhǔn)管：5mmol/L

注意事項(xiàng)

1. 樣本切勿反復(fù)凍融，最好在取血后12小時(shí)內(nèi)完成測(cè)定。

2. 配置好的試劑三4℃保存可半個(gè)月。

3. 線性范圍為0.15mmol/L-3.8mmol/L。

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