貼壁細胞凍存操作步驟

時間：2022/4/19

貼壁細胞凍存操作步驟：

1．選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天最好換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入等量*培養(yǎng)基終止消化。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。然后將細胞收集于離心管中離心(200g，5分鐘)。

2．去上清液，加入含20%以上小牛血清的*培養(yǎng)基或血清，于4℃預冷15分鐘后，加入10%的DMSO，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，分裝于細胞凍存管，細胞濃度為3×106～1×107/ml之間。

3．將上述細胞分裝于凍存管中，將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。

4．先將凍存管置入置于4℃ 30 min，再轉入-20℃ 2h后，再放入-80℃冰箱冷凍過夜，次日保存到液氮罐中。

目前更多使用程序降溫盒，將細胞凍存管放于盒內，直接置于超低溫冰箱，程序降溫盒可控制每分鐘下降1℃。目前也有商業(yè)化的快速凍存液，可不經過程序降溫過程，直接置于超低溫冰箱。

注：細胞凍存后可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，最好取出一支凍存管的細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。

久久亚洲精品天码av,午夜福利屄插穴,午夜福利视频91,亚欧美爽爽爽爽爽,亚洲欧美日韩色色图片,青青操在线观看,精品天堂麻豆av,无码av东京热,婷婷成人亚洲少妇

貼壁細胞凍存操作步驟

會員登錄

收藏該商鋪

提示