人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理：

將目標(biāo)抗體包被于微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本，其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合，然后加入人ELISA試劑盒微生物化的目標(biāo)抗體，將未結(jié)合的生物素抗體洗凈后，加入HRP標(biāo)記和親和素，再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（O.D.值），計(jì)算樣品濃度。

人ELISA試劑盒性能：

1. 靈敏度：小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。人ELISA試劑盒-ⅢELISA檢測試劑盒稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。

2. 特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。

3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

人ELISA試劑盒操作注意：

1.不同的試劑盒因工藝和操作方法略有不同，務(wù)必按照所用人ELISA試劑盒說明書嚴(yán)格操作，否則容易產(chǎn)生檢測結(jié)果的不確定性.

2.若不同批號人ELISA試劑盒的不同組分(A液或酶工作液)，或不同試劑的不同組分進(jìn)行交叉使用，有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高，花板等情形。

3.反應(yīng)時(shí)間的誤差，做大量標(biāo)本時(shí)，一孔和后一孔以及一些特殊標(biāo)本可能影響較大。

4.臨界值附近標(biāo)本波動(dòng)為正常現(xiàn)象，任何試劑均不可避免。可以考慮將標(biāo)本做奇數(shù)次復(fù)檢。

5.加樣時(shí)樣品量誤差，對于陰或很陽的標(biāo)本影響不大，但對閾值附近的標(biāo)本影響，建議校對加樣器。