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更新時(shí)間：2018-05-14 09:00:00瀏覽次數(shù)：3993次
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大鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒本公司專業(yè)代理和經(jīng)銷眾多生命科學(xué)領(lǐng)域的。*經(jīng)營Elisa試劑盒、抗體、酶、細(xì)胞等生物化學(xué)試劑。價(jià)格實(shí)惠，質(zhì)量有保證。詳細(xì)價(jià)格請咨詢在線人員。
| DD0193大鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒的詳細(xì)資料： |
| 本試劑盒只能用于科學(xué)研究，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。 大鼠白介素1α(IL-1α)定量檢測試劑盒(ELISA) 使用說明書 【試劑盒名稱】 大鼠白介素1α(IL-1α)定量檢測試劑盒(ELISA) 【試劑盒用途】 定量檢測大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中白介素1α(IL-1α)的含量。 【檢測原理】 本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本加入到預(yù)先包被大鼠白介素1α(IL-1α)單克隆抗體透明酶標(biāo)包被板中，溫育足夠時(shí)間后，洗滌除去未結(jié)合的成分，再加入酶標(biāo)工作液，溫育足夠時(shí)間后，洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入底物A、B，底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色產(chǎn)物，在酸的作用下變成黃色，顏色的深淺與樣品中大鼠白介素1α(IL-1α)濃度呈正相關(guān)，450nm波長下測定OD值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的OD值，計(jì)算樣本中大鼠白介素1α(IL-1α)含量。 【試劑盒組成】
備注：標(biāo)準(zhǔn)品(1號(hào)→6號(hào))濃度依次為：48、24、12、6、3、1.5 ng/L 【需要而未提供的試劑和器材】 1、 2、標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀 3、精密移液器及一次性吸頭 4、蒸餾水 5、一次性試管 6、吸水紙 【操作步驟】 1、準(zhǔn)備：從冰箱取出試劑盒，室溫復(fù)溫平衡30分鐘。 2、配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。 3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本：取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板，固定于框架上，分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣本孔和空白對照孔，記錄各孔位置，在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL；待測樣本孔中先加入待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍)；空白對照孔不加。 4、溫育： 5、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說明書操作洗板)。 6、加酶標(biāo)工作液：每孔加入酶標(biāo)工作液50μL，空白對照孔不加。 7、溫育： 8、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說明書操作洗板)。 9、顯色：每孔先加入顯色劑A 液50μL，再加入顯色劑B液 50μL，平板混勻器混勻30s(或用手輕輕震蕩混勻30s)， 10、終止：取出酶標(biāo)板，每孔加終止液50μL，終止反應(yīng)(顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。 11、測定：以空白孔調(diào)零，在終止后15分鐘內(nèi)，用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。 12、計(jì)算：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對應(yīng)的OD值，計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程，再根據(jù)樣本的OD值，在回歸方程上計(jì)算出對應(yīng)的樣品濃度，也可以使用各種應(yīng)用軟件來計(jì)算。zui終濃度為實(shí)際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。 【樣本要求】 1、樣本不能含疊氮鈉(NaN3)，因?yàn)?/span>疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑。 2、標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能立即試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 3、樣本應(yīng)充分離心，不得有溶血及顆粒。 【注意事項(xiàng)】 1、實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。 2、酶標(biāo)包被板開封后如未用完，應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。 3、建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對照都做雙份檢測，取平均值，以減小實(shí)驗(yàn)誤差。 4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍，計(jì)算結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。 5、本試劑盒定量范圍為1.5-48ng/L，超過此范圍，為標(biāo)準(zhǔn)曲線延伸計(jì)算所得，不做為準(zhǔn)確定量結(jié)果，請用特殊稀釋液稀釋后測定準(zhǔn)確結(jié)果(1.5-48ng/L范圍內(nèi))，乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本zui終濃度。 6、若顯色過淺，可適當(dāng)延長底物溫育時(shí)間。 7、為避免交叉污染，標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對照每加一個(gè)就要更換一次吸頭；酶標(biāo)工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分，要懸臂加樣，不得碰到微孔；不得重復(fù)使用封板膜。 8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用，不同批號(hào)的試劑不得混用。 9、底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。 【操作程序總結(jié)】 準(zhǔn)備試劑，樣品和標(biāo)準(zhǔn)品
計(jì)算 【檢測范圍】 1.5ng/L - 48ng/L 【規(guī)格】 96人份/盒 【貯藏】 2 【有效期】 6個(gè)月 |
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