用于檢測未知抗體的間接法:
1. 用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃過夜。次日洗滌3次。
2. 加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)。
3. 于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4. 加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。
5. 終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M*0.05ml。
小鼠(PⅢNP)ELISA Kit
Mouse N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA Kit
| 小鼠甲狀旁腺激素(PTH)ELISA試劑盒 | 進(jìn)口小鼠ELISA Kit | 48T/96T |
| 小鼠醛固酮(ALD)ELISA試劑盒 | 進(jìn)口小鼠ELISA Kit | 48T/96T |
| 小鼠促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA試劑盒 | 進(jìn)口小鼠ELISA Kit | 48T/96T |
| 小鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒 | 進(jìn)口小鼠ELISA Kit | 48T/96T |
| 小鼠17-酮類固醇(17-KS)ELISA試劑盒 | 進(jìn)口小鼠ELISA Kit | 48T/96T |
| 小鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA試劑盒 | 進(jìn)口小鼠ELISA Kit | 48T/96T |
| 小鼠β細(xì)胞素(BTC)ELISA試劑盒 | 進(jìn)口小鼠ELISA Kit | 48T/96T |
| 小鼠血管生長素(ANG)ELISA試劑盒 | 進(jìn)口小鼠ELISA Kit | 48T/96T |
樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。
2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)去除顆粒。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
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