1. 無(wú)菌室為專門進(jìn)行微生物指標(biāo)檢查的實(shí)驗(yàn)室，不得進(jìn)行其他試驗(yàn)。無(wú)菌檢查用無(wú)菌室與微生物限度檢查用無(wú)菌室應(yīng)各自獨(dú)立。藥品、食源性樣品檢查用無(wú)菌室各自獨(dú)立。 
2.無(wú)菌室應(yīng)設(shè)有無(wú)菌操作間和緩沖間，無(wú)菌操作間潔凈度應(yīng)達(dá)到10000級(jí)，工作臺(tái)的潔凈度應(yīng)達(dá)到100級(jí)。
3.設(shè)有連鎖式傳遞窗口，保證人流物流分開。
4.設(shè)有空氣凈化層流系統(tǒng)，保證潔凈室與室外壓差大于10Pa，相鄰潔凈室不同級(jí)別的壓差大于5Pa。
5.試驗(yàn)時(shí)室內(nèi)溫度應(yīng)控制在18～26℃，相對(duì)濕度在45～65%。
6.無(wú)菌室內(nèi)外環(huán)境應(yīng)保持清潔，無(wú)污染源。室內(nèi)僅存放必須的檢驗(yàn)用具，擺放整齊，保持清潔。嚴(yán)禁堆放雜物。
7.檢驗(yàn)人員必須持有本崗位上崗證，方可從事無(wú)菌檢驗(yàn)及微生物檢驗(yàn)工作 。
8.每次實(shí)驗(yàn)前，應(yīng)用消毒液（如2％的甲酚溶液，75％的酒精，0.1％的新潔爾滅溶液等）擦試無(wú)菌室工作臺(tái)面及可能污染的死角，開啟空氣凈化設(shè)備和臭氧發(fā)生器殺菌1小時(shí)。
9.進(jìn)入無(wú)菌室的檢驗(yàn)人員不得化裝、戴飾品、留指甲，經(jīng)洗手、消毒及更無(wú)菌衣后方可進(jìn)入無(wú)菌室。每次進(jìn)入無(wú)菌室的人數(shù)不超過(guò)2人。
10.實(shí)驗(yàn)用物品須滅菌或經(jīng)消毒處理后，放入傳遞窗，開啟傳遞窗凈化設(shè)備及紫外燈照射30分鐘后，方可移置無(wú)菌室操作間內(nèi)。在操作間內(nèi)除去物品的外包裝后，在百級(jí)工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)。
11.操作人員應(yīng)嚴(yán)格按照無(wú)菌操作的規(guī)程進(jìn)行操作。在操作中，若出現(xiàn)樣本污染環(huán)境及衣服等情況，應(yīng)及時(shí)消毒處理。
12. 試驗(yàn)后及時(shí)進(jìn)行清場(chǎng)，將移入的物品及產(chǎn)生的廢棄物全部移出，清潔工作臺(tái)面及地面，并進(jìn)行消毒處理，繼續(xù)開動(dòng)空氣凈化系統(tǒng)及開啟紫外燈殺菌30分鐘。
13.陽(yáng)性對(duì)照菌的接種應(yīng)在的菌種接種室（生物安全柜）內(nèi)進(jìn)行操作，各種菌均不得帶入無(wú)菌室。帶菌的或可能染有菌的物品，必須高壓滅菌后方可洗刷。
14. 無(wú)菌室每半年檢測(cè)一次室內(nèi)的潔凈度（塵埃粒子、浮游菌、壓差、溫度、濕度、換氣次數(shù)），檢驗(yàn)人員每次試驗(yàn)時(shí)監(jiān)測(cè)百級(jí)凈化工作臺(tái)的沉降菌，均應(yīng)記錄并符合規(guī)定。否則應(yīng)立即*消毒滅菌或更換過(guò)濾器。直至重復(fù)檢查符合要求，方可使用。
15.每次實(shí)驗(yàn)結(jié)束應(yīng)做好無(wú)菌室使用及監(jiān)控記錄。