1范圍
本標準規(guī)定了醫(yī)藥工業(yè)潔凈室和潔凈區(qū)中沉降菌的測試條件、測試方法。本標準適用于醫(yī)藥工業(yè)潔凈室和潔凈區(qū)，無菌室或無菌區(qū)域（包括潔凈工作臺）的沉降菌的測定和環(huán)境的驗證。
2引用標準
下列標準所飲食的條文，通過在本標準中引用而構成為本標準的條文。本標準出版時，所示版本均為不效。所有標準都會被修訂，使用本標準的各方應探討使用下列標準版本的可能性。
YY/T0188、6－1995藥品檢驗操作規(guī)程第6部分：藥品生物測定法
3定義 本標準采用下列定義。
3、1潔凈室（區(qū)） clean room（area）
3. 2潔凈工作臺cleaning work station 
一種工作臺或者與之類似的一個封閉圍檔工作區(qū)。其特點是自身能夠供給經(jīng)過過濾的空氣或氣體，如置、水平層流罩、潔凈工作、水平層流潔凈工作臺、自凈器等。
3、3潔凈度 cleanliness
潔凈環(huán)境內單位體積空氣中含大于或等于某一粒徑的懸浮粒子的允許統(tǒng)計數(shù)。
3. 4菌落colony forming units 
細菌培養(yǎng)后，由一個或幾個細菌繁殖而形成的一細菌集落，簡稱CFU。通常用個數(shù)表示。
3、5沉降菌 settling microbe
用本標準提及的方法收集到的活微生物粒子，通過的培養(yǎng)基，在適宜的生長條件下繁殖到可見的菌落數(shù)。
3、6懸浮粒子 ailborne Paritical
可懸浮在空氣中的尺寸一般在0、001μm~1000μm之間的固體、液體或兩者的混合物質，包括生物性粒子和非生物性粒子。
3、7單向流 unidirectional air flow（曾稱為層流laminar flow）沿著平行流線，以單一通路以一定流速向流動的氣流。
3、8非單向流水線 nonunidirectional air flow（曾稱為亂流turbulent flow）具有多個循環(huán)特性或氣流方向不平行的，不滿足單向流定義的氣流。
3、9靜態(tài)測試 at-rest test
潔凈室凈化空氣調節(jié)系統(tǒng)已處于正常運行狀態(tài)，工藝設備已安裝，潔凈室內沒有生產(chǎn)人員的情況下進行的測試。
3、1、0動態(tài)測試 operational test
潔凈室已處于正常生產(chǎn)狀態(tài)下進行的測試。
4測試方法
4. 1方法概述本測試方法采用沉降法，即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養(yǎng)基平皿，經(jīng)若干時間，在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落進行計數(shù)，以平板培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來判定潔凈環(huán)境內的活做生物數(shù)，并以此來評定潔凈室的潔凈度。
4、2所用的儀器和設備
4、2、1高壓消毒鍋 使用時應嚴格按照儀器說明書操作。
4、2、2恒溫培養(yǎng)箱 必須定期對培養(yǎng)箱的溫度計進行檢定。
4、2、3培養(yǎng)皿 一般采用?90mm×15mm的棚硅酸玻璃培養(yǎng)皿。
4、2、4培養(yǎng)基
普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基或其他藥典認可的培養(yǎng)基。其配制方法見附錄A（標準的附錄）
4、3測試步驟
4、3、1采樣方法 將已制備好的培養(yǎng)皿按5、4、1、2的要求放置打開培養(yǎng)皿蓋使培養(yǎng)基表面暴露0、5h，再將培養(yǎng)皿蓋蓋上后倒置。
4、3、2培養(yǎng)
4、3、2、1全部采樣結束后，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4、3、2、2在30~35度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時間不少于48小時。
4、3、2、3每批培養(yǎng)基應有對照試驗，檢驗培養(yǎng)基本身是否污染?？擅颗x定3只培養(yǎng)皿作對照培養(yǎng)。
4、3、3菌落計數(shù)
4、3、3、1用肉眼直接計數(shù)，標記或在菌落計數(shù)器上點計，然后用5~10倍放大鏡檢查，有否遺漏。
4、3、3、2若培養(yǎng)皿上有2個或2個以上的菌落重疊，可分辨時仍以2個或2個以上菌落計數(shù)。
4、4注意事項
4、4、1測試用具要作滅菌處理，以確保測試的可靠性、正確性。
4、4、2采取一切措施防止人為對樣本的污染。
4、4、3對培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細的記錄。
4、4、4由于細菌種類繁多，差別甚大，計數(shù)時一般用透射光于培養(yǎng)血背面或正面仔細觀察，不要漏計培養(yǎng)皿邊緣生長的菌落，并須注意細菌菌落與培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別，必要時用顯微鏡鑒別。
4、4、5采樣前應仔細檢查每個培養(yǎng)皿的質量，如發(fā)現(xiàn)變質、破損或污染的應剔除。
5 測試規(guī)則
5、1測試狀態(tài)
5、1、1沉降菌測試前，被測試潔凈室的溫濕度須達到規(guī)定的要求，靜壓差、換氣次數(shù)、空氣流速必須控制在規(guī)定值內。
5、1、2沉降菌測試前，被測試潔凈室已經(jīng)過消毒。
5、1、3測試狀態(tài)有靜態(tài)或動態(tài)兩種，測試狀態(tài)的選擇必須符合生產(chǎn)的要求，并在報告中注明測試狀態(tài)。
5. 2測試人員
5、2、1測試人員必須穿戴符合環(huán)境潔凈度級別的工作服。
5、2、2靜態(tài)測試時，室內測試人員不得多于二人。
5、3測試時間
5、3、1對單向流，如100級凈化房間及層流工作臺，測試應在凈化空調系統(tǒng)正常運行不少于10min后開始。
5、3、2對非單向流，如10000級、100000級以上的凈化房間，測試應在凈化空調系統(tǒng)正常運行不少于30min后開始。
5、4沉降菌計數(shù)
5、4、1采樣點數(shù)目及其布置
5、4、1、1zui少采樣點數(shù)目
沉降法的zui少采樣點數(shù)可按表1確定。
表1zui少采樣點數(shù)目

在滿足zui少測點數(shù)的同時，還宜滿足zui少培養(yǎng)皿數(shù)，見表2。
表2zui少培養(yǎng)皿

5、4、1、2采樣點的布置
采樣點的位置可以同懸浮粒子測試點。
A. 工作區(qū)采樣點的位置離地0、8~1、5m左右（略高于工作面）。
B. 可在關鍵設備或關鍵工作活動范圍處增加采樣點。
采樣點位置的詳細規(guī)則見附錄B（標準的附錄）。
5、5記錄
測試報告中應記錄房間溫度、相對濕度、壓差及測試狀態(tài)。
測試報告的編寫見附錄C（標準的附錄）。
5、6結果計算
5、6、1用計數(shù)方法得出各個培養(yǎng)M的菌落數(shù)。
5、6、2平均菌落數(shù)的計算，見式（1）。平均菌落數(shù)M=M1+M2+…Mn／n式中：M-平均菌落數(shù)；
M1-1號培養(yǎng)皿菌落數(shù)；
M2-2號培養(yǎng)血菌落數(shù)；
Mn-n號培養(yǎng)皿菌落數(shù)；
n-培養(yǎng)血總數(shù)。
5、7結果評定 用平均菌落數(shù)判斷潔凈室空氣中的微生物。
5、7、1潔凈室內的平均菌落數(shù)必須低于所選定的評定標準。
5、7、2若某潔凈室內的平均菌落數(shù)超過評定標準，則必須對此區(qū)域先進行消毒，然后重新采樣兩次，測試結果均須合格