一、背景介紹
骨骼肌是機(jī)體代謝與運(yùn)動的關(guān)鍵組織，其細(xì)胞異質(zhì)性研究在肌肉再生、衰老、肌少癥等方向具有重要價(jià)值。單細(xì)胞RNA測序和流式分析等技術(shù)對樣本質(zhì)量要求較高，高質(zhì)量單細(xì)胞懸液的制備是下游實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵前提。
然而，骨骼肌含有大量肌纖維、結(jié)締組織和脂肪，傳統(tǒng)手工研磨結(jié)合酶消化的方法存在耗時(shí)長（3-4小時(shí)）、細(xì)胞活率波動大、重復(fù)性差等痛點(diǎn)。
二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>
使用單細(xì)胞懸液制備儀制備小鼠骨骼肌單細(xì)胞懸液，評估細(xì)胞活率及懸液質(zhì)量，驗(yàn)證其是否滿足單細(xì)胞測序及流式分析需求。
三、實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
四、實(shí)驗(yàn)步驟
樣本前處理：取新鮮骨骼肌，置于緩沖液中，去除明顯脂肪與筋膜，將組織轉(zhuǎn)移至消化管中，使用眼科剪剪碎，加入適量消化酶。
儀器設(shè)置：在觸控面板設(shè)定消化程序（37℃，選擇骨骼肌專用程序），點(diǎn)擊啟動。消化過程中可暫停打開蓋子觀察消化狀態(tài)。
過濾與終止：解離完成后取出消化管，使用40μm濾網(wǎng)過濾，加入適量終止液終止消化。根據(jù)情況可搭配去碎片劑去除細(xì)胞碎片。
收樣與質(zhì)檢：離心洗滌后，使用臺盼藍(lán)或AOPI染料，用細(xì)胞計(jì)數(shù)器評估細(xì)胞活性與數(shù)量。
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
六、儀器核心優(yōu)勢
七、關(guān)鍵參數(shù)說明
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