【參數(shù)信息】
英文名稱：Annexin V-iFluor 594標(biāo)記；Annexin V-iFluor 594 Conjugate；
iFluor 594-Annexin V Conjugate
中文名稱：iFluor 594標(biāo)記膜聯(lián)蛋白V；膜聯(lián)蛋白V-iFluor 594偶聯(lián)物
生產(chǎn)廠商：西安強(qiáng)化生物科技
【簡單概述】（iFluor 594標(biāo)記膜聯(lián)蛋白V）
Annexin V-iFluor 594 是一種將熒光染料 iFluor 594 與凋亡指示蛋白 Annexin V 偶聯(lián)的探針，用于檢測細(xì)胞早期凋亡。
iFluor 594 具有激發(fā)波長約 590 nm、發(fā)射波長約 617 nm，熒光亮度高，適用于共聚焦顯微鏡及流式細(xì)胞術(shù)等多種成像技術(shù)。
Annexin V 可特異性識別并結(jié)合細(xì)胞膜外翻的PS，從而實現(xiàn)對早期凋亡細(xì)胞的標(biāo)記。
該探針?biāo)苄粤己?，背景低，適用于多重染色實驗中紅色通道的標(biāo)記需求。
Annexin V-iFluor 594 is a probe that couples the fluorescent dye iFluor 594 with the apoptosis-indicating protein Annexin V, designed for detecting early-stage cellular apoptosis.
Featuring an excitation wavelength of approximately 590 nm and emission wavelength of 617 nm, this high-brightness fluorescent probe is compatible with various imaging techniques including confocal microscopy and flow cytometry.
Annexin V can specifically recognize and bind to phosphatidylserine (PS) that is flipped out of the cell membrane, thus enabling the labeling of early apoptotic cells.
The probe has good water solubility and low background, which is suitable for the red channel labeling in multi-color staining experiments.
高靈敏度與特異性：通過結(jié)合外翻的PS，高效檢測早期凋亡細(xì)胞。
非放射性檢測：提供安全、簡便的凋亡檢測方法，無需放射性物質(zhì)。
快速簡便的操作流程：染色與分析步驟簡單，實驗操作時間短。
廣泛的應(yīng)用范圍：適用于多種細(xì)胞類型及實驗條件。
【Annexin V-iFluor 594標(biāo)記關(guān)于PS外翻的識別過程和原理是怎樣的？】
PS通常分布于細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，但在細(xì)胞凋亡早期，PS會從內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜外側(cè)。Annexin V是一種鈣離子依賴性磷脂結(jié)合蛋白，對PS具有高親和力和特異性，可與之結(jié)合。
iFluor 594是一種熒光染料，標(biāo)記在Annexin V上后，可通過熒光信號（紅色）直接示蹤PS的外翻現(xiàn)象。該標(biāo)記不會穿透完整細(xì)胞膜，因此僅結(jié)合于膜外暴露的PS，需與膜不透性核酸染料聯(lián)用，以區(qū)分凋亡細(xì)胞、壞死細(xì)胞及正常細(xì)胞（雙陰性）。
樣本制備：收集待測細(xì)胞（如經(jīng)凋亡誘導(dǎo)處理），重懸于含Ca2?的緩沖液中（通常為1× Binding Buffer），以維持Annexin V的PS結(jié)合活性。
標(biāo)記染色：向細(xì)胞懸液中加入Annexin V-iFluor 594試劑，避光孵育15–30分鐘（室溫或4°C），使探針充分結(jié)合外翻PS。
染料聯(lián)用：同步加入PI等 viability dye（如需區(qū)分壞死），避免洗滌步驟導(dǎo)致細(xì)胞損傷或信號丟失。
檢測分析：立即通過流式細(xì)胞術(shù)或熒光顯微鏡檢測。Annexin V-iFluor 594的紅色熒光信號（Ex/Em ≈ 590/617 nm）用于量化PS外翻水平，結(jié)合PI的綠色熒光可進(jìn)一步區(qū)分細(xì)胞狀態(tài)。
【相關(guān)試劑】
Caspase 8熒光底物Ac-IETD-AFC 綠
Cyanine 3 bisacid [equivalent to
Cyanine 5.5 bissuccinimidyl ester
Cyanine 7 monosuccinimidyl ester
Caspase 3/7熒光底物Ac-DEVD-AMC 藍(lán)
蛋白酶體20S熒光底物(Suc-LLVY)2R110
Caspase 9熒光底物 FITC-C6-LEHD-FMK 綠
Caspase 3/7熒光底物 Z-IETD-ProRed 620 紅
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